使用Amicon® Ultra标准式离心超滤管,无需稀释样品,只要经过几轮洗滤操作,就能有效去除抗体标记反应中的未结合标记物。可按下列步骤通过离心超滤管去除未反应的荧光标记。
去除抗体标记反应后的未结合荧光标记物
图 1.FITC标记BSA在洗滤前和每次洗滤后(共4次)的SDS-PAGE电泳图。起始材料和首次滤过液中可见游离FITC。1次超滤后去除大部分游离标记,后续超滤后基本不见游离FITC。图2的荧光检测数据可证实该结果。
图 2.1次超滤后,游离FITC信号减少约80%,后续超滤后信号减少98%。说明超滤可取代凝胶过滤用于蛋白标记反应物的纯化。
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