抗生素杀灭曲线是一项剂量响应实验,通过逐渐增大施加在哺乳动物细胞中的备选抗生素剂量,测定特定时间内杀死所有细胞的最低抗生素浓度。这是使用备选抗生素杀死未转染细胞、形成稳定细胞系之前的关键步骤。由于每种哺乳动物细胞系对抗生素的敏感程度不一,因此始终建议针对不同细胞系和抗生素单独进行杀灭曲线实验。
下表列出了此剂量响应实验可能采用的常用备选抗生素浓度范围。
剂量响应可能因待测细胞系而异。此处的浓度范围仅供参考;初次使用备选抗生素或将其用于新细胞系时,必须单独进行杀灭曲线实验。
以下实验方案概述了绘制细胞杀灭曲线的步骤。
准备物品:
步骤:
注意:细胞处于活跃分裂状态时,抗生素最有效。 因此,建议采用最优细胞密度,以实现最准确的剂量响应。
图 1.示意图 - 备选抗生素浓度。
图 2.模拟抗生素杀灭曲线
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