X-tremeGENETM HP、X-tremeGENETM 9和X-tremeGENETM 360转染试剂
成功进行细胞转染的能力取决于细胞类型、实验方案和转染试剂的组成。X-tremeGENE™旨在用于将一系列分子（包括DNA、小RNA和CRISPR/Cas9组分）有效转染进入常见和难转染的细胞。
新产品：X-tremeGENE™ 360转染试剂是一种高效、多功能且可靠的解决方案，用于将siRNA/miRNA、质粒DNA和CRISPR/Cas9材料递送至难转染和常见的细胞类型中。如需更多信息，请访问sigmaaldrich.com/xtg360ro。
图 1.X-tremeGENE™ HP试剂可高效转染人原代成纤维细胞。
原代成纤维细胞分离自人包皮，在6孔细胞培养板中使用4 μL X-tremeGENE™ HP试剂和1 μg编码了GFP的质粒DNA进行转染。转染后48小时观察GFP的表达。左图显示的是GFP荧光，右图显示的是相应的明场图像。
图 2.在人间充质干细胞的转染中，X-tremeGENE™ HP和X-tremeGENE™ 9试剂的效果优于竞品试剂。
人间充质干细胞分离自四个不同供体的骨髓吸出物。按照指定的比例（试剂μL数：编码了GFP质粒DNA μg数），使用X-tremeGENE™ HP试剂（XHP）、X-tremeGENE™ 9试剂（X9）和竞品试剂（LTX）进行细胞转染。X-tremeGENE™ 9试剂未进行2:1比例测试）。未转染细胞作为对照（阴性）。转染后48小时进行FACS分析。
图 3.在难转染细胞类型中，X-tremeGENE™ HP DNA转染试剂的效果优于竞品试剂。
图 4.在A549细胞中，X-tremeGENETM 360的效果优于Lipofectamine试剂。使用X-tremeGENETM 360、Lipofectamine® 2000（Thermo Fisher Scientific）或Lipofectamine® 3000（Thermo Fisher Scientific），分别按照指定的试剂/DNA比例将编码了荧光素酶的质粒DNA转染进入A549细胞。 采用一种常规的荧光素酶活性测定方法对转染效率进行评估。通过对受损细胞胞浆中稀释的LDH进行定量，并与单独细胞进行对比来对细胞毒性进行评估。与采用Lipofectamine® 2000或Lipofectamine® 3000转染的细胞相比，采用X-tremeGENETM 360按最佳比例进行转染的细胞表现出了更高的转基因表达和更低的细胞毒性。
按照指定的比例（试剂μL数：编码了GFP质粒DNA μg数），使用X-tremeGENE™ HP试剂（XHP）和竞品试剂（LTX和L2K）进行细胞转染。通过使用显微镜观察GFP荧光而对转染效率进行可视化评估。
针对不同细胞类型的产品推荐 |
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注意：以上数据是使用编码了GFP的pcDNA3.1质粒或编码了荧光素酶的pCI质粒生成的，二者均带有巨细胞病毒（CMV）启动子。这些推荐是基于实验结果而作出的指导。必须通过经验来确定理想的试剂/DNA比例。
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