免疫球蛋白纯化方案通常包括与Protein A或Protein G层析介质的亲和吸附、未吸附蛋白洗涤以及低pH缓冲液洗脱。所得纯化抗体通常稀释度较高,不适合下游研究或长期储存。通常需要通过透析浓缩抗体,和/或置换可保留蛋白质活性的缓冲液。洗滤可更快实现相同结果,免疫球蛋白回收率高达 99%,并且一步除盐(请参阅浓缩、脱盐和缓冲液置换方案)。
使用 Prosep® A 和 Prosep® G Montage® 抗体纯化试剂盒和 Amicon® Ultra-15 mL离心超滤管纯化和浓缩兔 IgG。
图 1.使用 Amicon Ultra-15 装置浓缩兔 IgG。使用 Montage PRSEP-A pr PROSEP-G 抗体纯化试剂盒纯化 IgG。线条显示 IgG 体积减少,而柱状图显示 20 分钟离心时间后 IgG 浓度成比例增加。
图 2.使用 Amicon Ultra-15 装置浓缩前后的纯化兔 IgG 的 SD-PAGE 凝胶结果。
如要继续阅读,请登录或创建帐户。
暂无帐户?