biological source
mouse
Quality Segment
antibody form
purified immunoglobulin
antibody product type
primary antibodies
clone
A60, monoclonal
species reactivity
avian, pig, chicken, human, rat, salamander, ferret, mouse
manufacturer/tradename
Chemicon®
technique(s)
flow cytometry: suitable, immunocytochemistry: suitable, immunofluorescence: suitable, immunohistochemistry (formalin-fixed, paraffin-embedded sections): suitable, immunoprecipitation (IP): suitable, western blot: suitable
isotype
IgG1
shipped in
wet ice
target post-translational modification
unmodified
Gene Information
human ... RBFOX3(146713)
mouse ... Rbfox3(52897)
rat ... Rbfox3(287847)
General description
46/48 kDa
NeuN抗体(神经元核;克隆A60)特异性识别DNA结合的神经元特异性蛋白NeuN,该蛋白存在于所有检验的脊椎动物的大多数CNS和PNS神经元细胞类型中。NeuN蛋白的分布明显局限于胎儿和成人大脑中的神经元细胞核、核周体和一些近端神经元突起,但有些神经元在所有年龄段都不能被NeuN识别:例如,INL视网膜细胞、Cajal Retzius细胞、Purkinje细胞、下橄榄核和齿状核神经元以及交感神经节细胞(Mullen等人,1992;Wolf等人,1996)。免疫组织化学可检测到的NeuN蛋白首先出现在与神经元退出细胞周期和/或神经元终末分化开始相对应的发育时间点(Mullen等人,1992)。免疫反应性出现在小鼠神经管中的E9.5附近,并在E12.5的整个发育中的神经系统中广泛存在。强烈的核染色表明核调节蛋白功能。但是,目前尚无关于NeuN蛋白抗原是否在远端细胞质中具有功能或在转运回细胞核之前仅在那里合成的证据。从纯化的细胞核和全脑提取物中分离的蛋白质在免疫印迹上没有发现差异(Mullen等人,1992)。
Immunogen
纯化小鼠脑细胞核
Application
抗NeuN抗体,克隆A60可检测NeuN水平,已发表并经验证可用于FC、IC、IF、IH、IH(P)、IP和WB。
研究子类别
神经 & 胶质标记
神经 & 胶质标记
研究类别
神经科学
神经科学
蛋白质印迹分析:
前一批抗体在46-48 kDa范围内识别出2-3个条带,可能在66 kDa左右识别出另一条带。
免疫细胞化学:
使用先前批次的1:10-1:100稀释液。培养的神经元应使用0.1% Triton X-100渗透。所应使用仅含有缓冲液和一抗、不含多余蛋白块或洗涤剂的简单溶液对一抗进行稀释。
免疫组化:
1:100-1:1,000。该抗体在聚酯蜡包埋组织上效果最好,但也能以较低的工作稀释度在石蜡包埋组织上发挥作用。该抗体可与甲醛固定剂很好地结合。成功应用了柠檬酸和微波预处理(Sarnat,1998)。
免疫组化(石蜡)分析:前一批用于IH(P)。
最佳工作稀释度必须由最终用户确定。
前一批抗体在46-48 kDa范围内识别出2-3个条带,可能在66 kDa左右识别出另一条带。
免疫细胞化学:
使用先前批次的1:10-1:100稀释液。培养的神经元应使用0.1% Triton X-100渗透。所应使用仅含有缓冲液和一抗、不含多余蛋白块或洗涤剂的简单溶液对一抗进行稀释。
免疫组化:
1:100-1:1,000。该抗体在聚酯蜡包埋组织上效果最好,但也能以较低的工作稀释度在石蜡包埋组织上发挥作用。该抗体可与甲醛固定剂很好地结合。成功应用了柠檬酸和微波预处理(Sarnat,1998)。
免疫组化(石蜡)分析:前一批用于IH(P)。
最佳工作稀释度必须由最终用户确定。
Biochem/physiol Actions
MILLIPORE针对脊椎动物神经元特异性核蛋白NeuN(或神经元核)的独有单克隆抗体可与小鼠整个神经系统的大多数神经元细胞类型反应,如小脑、大脑皮层、海马、丘脑、脊髓、包括背根神经节、交感神经链神经节和肠神经节在内的外周神经系统神经元。′在发育过程中,首先在神经元发生有丝分裂后不久观察到免疫反应性,在增生区未观察到染色。免疫组化染色主要位于神经元的细胞核,细胞质染色较浅。少数不与MAB377反应的细胞类型包括浦肯野细胞、二尖瓣细胞和感光细胞。该抗体是原代培养和视黄酸刺激的P19细胞的极佳神经元标记物。它还可用于识别移植物中的神经元。
Physical form
形式:纯化
纯化小鼠免疫球蛋白IgG1的缓冲液溶液,含有0.02 M 磷酸盐缓冲液、0.25 M NaCl和0.1%叠氮化钠,pH 7.4。
纯化的蛋白 A
Preparation Note
自收到之日起在2-8ºC可稳定保存6个月。
Analysis Note
对照
阳性对照 - 脑组织。阴性对照 - 任何非神经元组织,例如成纤维细胞
阳性对照 - 脑组织。阴性对照 - 任何非神经元组织,例如成纤维细胞
采用免疫组化法对脑组织进行常规评估。
免疫组化(石蜡)分析:
用pH 6.0的柠檬酸盐预处理的组织。使用带有HRP-DAB的IHC-Select Detection将这批抗体稀释至1:100。 免疫反应性表现为颗粒层神经元的核染色。 要注意的是,在浦肯野细胞的细胞核中没有检测到信号。
pH 6.0的柠檬酸盐缓冲液的最佳染色,抗原表位检索:大鼠小脑
免疫组化(石蜡)分析:
用pH 6.0的柠檬酸盐预处理的组织。使用带有HRP-DAB的IHC-Select Detection将这批抗体稀释至1:100。 免疫反应性表现为颗粒层神经元的核染色。 要注意的是,在浦肯野细胞的细胞核中没有检测到信号。
pH 6.0的柠檬酸盐缓冲液的最佳染色,抗原表位检索:大鼠小脑
Other Notes
Legal Information
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
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12 - Non Combustible Liquids
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