一抗

图 1.使用抗β-肌动蛋白抗体一抗进行免疫细胞化学染色的示例。
一抗可定位、检测、识别和定量靶标分子。它们直接与目标抗原蛋白结合。一抗可以制成多克隆抗体、单克隆抗体或重组抗体。
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多克隆抗体
多克隆抗体通过向动物注射目标抗原产生。数周后收集动物血清,可直接使用或进一步纯化以分离抗体。多克隆抗体通常可识别多个表位,使其对抗原性质细微变化具有更高的耐受性。
单克隆抗体
单克隆抗体是实验室制备的均质抗体,通过将B细胞与永生化细胞融合而产生的杂交瘤细胞产生,从而可以产生相同抗体的多个拷贝。它们能够识别高度特异性和独特的表位,具有强大的亲和力,且交叉反应概率较低。
重组抗体
重组抗体是抗体基因克隆到表达载体中而产生的单克隆抗体,未使用杂交瘤。这类抗体可使用合适的寡核苷酸引物从任何物种克隆出来。这项技术有助于避免传统杂交瘤生产相关的细胞系漂移和突变等问题。
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不同类型一抗的优缺点
标记一抗
标记一抗通常用于信号扩增和检测,无需使用二抗。一抗可直接与荧光团、酶或生物素偶联。不同的抗体偶联物表现出不同的稳定性,需要特定的缓冲液和储存条件才能长期保持其最大活性。
一抗研究领域
癌症研究用一抗
检测异常蛋白和肿瘤相关抗原的一抗,是癌症研究中的宝贵工具。一些一抗可用于阻断致癌途径、刺激抗体依赖性细胞毒作用 (ADCC) 以及激活补体依赖性细胞毒作用。这些抗体对于研究肿瘤标志物、肿瘤抑制因子、侵袭、转移、自噬、细胞凋亡和血管生成至关重要,有助于全方位深入了解癌症生物学和治疗。
通过我们的利用重组抗体研究癌症特征页面,查找专门针对癌症特征的重组抗体。
神经科学研究用一抗
一抗在神经系统生理学和病理学研究中发挥着至关重要的作用,可让研究人员识别和分析特定的蛋白质和细胞标志物。 它们对于研究突触生物学、理解阿尔茨海默病和帕金森病等神经退行性疾病至关重要。此外,这些抗体还有助于探索神经炎症——这是各种神经系统疾病的关键因素。
表观遗传学研究用一抗
一抗还可以帮助探索开启和关闭基因的表观遗传过程。 DNA甲基化和组蛋白的翻译后修饰是主要的表观遗传因子之一。
一抗的应用
一抗是研究蛋白质及其相互作用的各类实验室技术必不可少的工具。它们能够通过不同的实验技术精确的检测、定量和分析特定蛋白质,例如:
- ELISA: 一种孔板检测技术,用于检测和定量可溶性物质。此技术兼具抗体的特异性和简单酶联免疫吸附测定的灵敏度。
- 蛋白质印迹:检测蛋白质混合物中的特定蛋白质分子。
- 免疫细胞化学: 使用特异性识别目标靶标的抗体,使细胞中的蛋白质或其他抗原可视化。
- 免疫组织化学: 选择性识别组织切片细胞中的抗原(蛋白质)。
- 免疫沉淀: 使用与蛋白质特异性结合的抗体,从溶液中沉淀蛋白质抗原。该技术可从含有数千种不同蛋白质的样品中分离并浓缩蛋白质。
- 流式细胞术: 检测和测定细胞群的物理和化学特性。利用光散射模式测定细胞的大小和细胞内复杂成分。
- 亲和结合测定 :测定单个抗原和抗体之间结合相互作用的强度。数值越低,表示结合亲和力越高。
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