细胞计数与健康分析

人工计数

带诺伊鲍尔网格的血细胞计数板等细胞计数板是手动/目视细胞计数常用的设备。将少量细胞悬液加载到带网格、精密研磨的玻璃计数板中，细胞悬液会通过毛细作用在蚀刻网格上扩散开来。随后在显微镜下观察细胞，并使用手动计数器进行计数。利用计数板预设的体积和网格系统，即可计算出细胞浓度。 目前已有基于成像技术的系统，可实现计数过程的自动化。

自动细胞计数

许多自动细胞计数设备采用与血细胞计数法相同的视觉计数染料和原理。与依赖物体识别的自动细胞计数仪不同，基于库尔特原理的设备因其易用性和精度而广受欢迎。 库尔特计数器将细胞悬液泵送通过传感器，该传感器基于电阻变化来检测细胞。这使得细胞检测更加可靠——即使是微小细胞也能被准确检测——并能实现高精度的细胞计数。手持式便携机型（类似于移液器）可直接在培养柜内进行细胞计数。

细胞存活率检测

DNA合成：监测细胞内活跃的DNA合成是某些细胞增殖检测的基础。可通过引入修饰核苷（如放射性³H-胸苷或非放射性溴脱氧尿苷（BrdU））来测定DNA复制，其中BrdU可通过抗体进行检测。

代谢活性：用于测量代谢活性的热量法检测适用于分析细胞增殖、细胞存活率和细胞毒性。四唑盐（如MTT、XTT和WST-1）还原为有色吩嗪化合物的过程仅发生在代谢活跃的细胞中。ATP的存在也是代谢活性的指标之一。 在萤火虫荧光素酶报告基因检测中，分裂细胞产生的ATP用于氧化D-荧光素，从而产生生物发光作为检测信号。

染料排斥法：台盼蓝染色常用于活细胞计数。该方法基于以下原理：活细胞不摄取该染料，而死细胞会摄取染料，并在显微镜下呈现蓝色。

荧光细胞存活率检测：5(6)-羧基荧光素二乙酸酯 N-琥珀酰亚胺酯（CFSE）标记是测定细胞群体中已完成细胞分裂周期数量的常用方法。另一种膜通透性染料——卡尔塞因-AM（Calcein-AM）本身不具有荧光性，但在活细胞内水解后会发出强烈的绿色荧光。 相比之下，核染料碘化丙吡啶（PI）只能通过已死亡细胞受损的细胞膜进入细胞核。由于卡尔塞因和PI-DNA均可被490 nm光激发，因此使用单激发荧光显微镜即可同时监测活细胞和死细胞。