抗三甲基组蛋白H3（Lys4）抗体

在含 0.1 M Tris-甘氨酸（pH 7.4）150 mM NaCl 和 0.05％ 叠氮化钠的缓冲液中的纯化的兔多克隆抗体

抗三甲基组蛋白H3 (Lys4)（货号 07-473 是一种兔多克隆抗体，可检测赖氨酸4上的三甲基化组蛋白 H3，并通过ChIP、斑点印迹、免疫细胞化学和蛋白质印迹应用测试。

组蛋白H3.1t（UniProt：Q16695；也称为H3/t、H3t、H3/g）在人体中由HIST3H3（又称H3FT）基因（基因 ID：8290）编码。组蛋白是一种高度保守的碱性核蛋白，负责真核生物中染色质的核小体结构。它们在转录调节、DNA修复、DNA复制和染色体稳定性中起着核心作用。四个核心组蛋白（H2A、H2B、H3和H4）中每种两个分子可形成一个八聚体，DNA被包裹在称为核小体的重复单元中，这限制了DNA对需要DNA作为模板的细胞机制的可及性。组蛋白 H3 具有一个主球状结构域和一个长N末端尾部——该尾部从球状核小体核心伸出，可经历几种不同类型的表观遗传修饰，从而影响细胞进程。组蛋白的N末端尾部会发生翻译后修饰（包括磷酸化、乙酰化和甲基化），负责招募下游调节因子、影响染色质结构，并成为转录的关键决定因素。通过组蛋白乙酰转移酶，可组蛋白H3尾部的几个赖氨酸残基进行乙酰化。乙酰化通常与转录活性和赖氨酸甲基化程度相关，且根据修饰的残基，可以激活或抑制精氨酸残基的甲基化。组蛋白H3的三甲基化是研究最最广泛的表观遗传标记之一。据报道，H3K4me3 修饰始终在转录起始位点发生，H3K4me3 结构域与在胚胎植入前发育以及从内部细胞团衍生出胚胎干细胞和从滋养外胚层衍生出滋养层干细胞的过程中较高的转录活性和细胞标识有关。 （参考文献：Sharifi-Zarchi, A., et al. (2017).BMS Genomics.18; Article 964; Liu, X., et al. (2016).Nature.537(7621); 558-562).

KLH标记线性肽，对应于赖氨酸4三甲基化的人组蛋白H3的N-末端区域的10个氨基酸。

表位：三甲基化（Lys4）

芯片分析
一个独立的实验室表明，该抗体在染色质免疫沉淀（ChIP）中起作用。
点印迹分析：一个代表性批次以 1：10,000 的稀释度在 Absurance Histone H3 抗体特异性阵列（货号 16-667）和 Absurance Histone H2A、H2B、H4 抗体特异性阵列（货号 16-665 号）中检测到三甲基组蛋白 H3（Lys 4）。
ChIP-seq 分析：
使用 Magna ChIP HiSens 试剂盒（货号 17-10460），1 µL 抗三甲基组蛋白 H3（Lys4）抗体（货号 07-473），20 µL 蛋白 A/G 珠和 1e6 交联 HeLa 进行染色质免疫沉淀细胞染色质，然后使用磁珠纯化 DNA。使用标准规程从 Input 和 ChIP DNA 样品制备文库，带 Illumina 条形码适配器，并在 Illumina HiSeq 仪器上进行分析。在去除 TagDust（http://genome.gsc.riken.jp/osc/english/dataresource）标签后，使用 Bowtie（http://bowtie-bio.sourceforge.net/manual.shtml）映射了 FastQ 文件中的超过 1800 万次读取。使用 MACS（http://luelab.dfci.harvard.edu/MACS/）识别峰，并从 BigWig 和 BED 文件在 UCSC Genome Browser（http://genome.ucsc.edu）中以自定义轨道的形式显示峰和读数。在 07-473 数据集中识别出的最高 25％ 峰与 HeLa S3 的 ENCODE H3K4me3 BROAD 组蛋白轨迹中识别出的峰有 99％ 重叠。

抗三甲基组蛋白H3 (Lys4)（货号 07-473 是一种兔多克隆抗体，可检测赖氨酸4上的三甲基化组蛋白 H3，并通过ChIP、斑点印迹、免疫细胞化学和蛋白质印迹应用测试。

研究子类别
组蛋白

研究类别
表观遗传学&核功能

该兔多克隆抗体可特异性检测赖氨酸4上的三甲基化组蛋白 H3 (H3Kme3)。

亲和纯化

在含 0.1M Tris-甘氨酸（pH 7.4），150mM NaCl 和 0.05％ 叠氮化钠的缓冲液中的亲和纯化的兔多克隆抗体。

自发运之日起，在 2-8ºC 条件下可稳定保存1年

对照
HeLa 核提取物

通过蛋白质印迹法对 HeLa 酸提取的核制剂（阳性）和重组组蛋白 H3（阴性）进行了评估。

蛋白质印迹分析：
该抗体以 1：5,000：– 1：10,000 的稀释度在 HeLa 核酸提取物中检测到三甲基化组蛋白 H3（Lys4）。

替代品：04-791

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