ChIPAb+ 单甲基组蛋白H3(Lys9) - ChIP免疫沉淀验证抗体和引物试剂套装

对每批、每次的全部ChIPAb+抗体的染色质沉淀进行单独验证。每个ChIPAb+抗体组均包含对照引物（通过qPCR对每个批次进行检测），以在基因座特异性环境下对IP结果进行生物学验证。提供了qPCR方案和引物序列，使研究人员能够在染色质环境中使用我们的抗体时验证ChIP方案。每组还包括阴性对照抗体，以确保ChIP反应的特异性。
ChIPAb+单甲基组蛋白H3(Lys9)套装包括抗单甲基组蛋白H3(Lys9)抗体，阴性对照抗体（纯化的小鼠IgG）和qPCR引物（可扩增人GAPDH基因编码区的213 bp）。 单甲基组蛋白H3(Lys9)和阴性对照抗体的规格与ChIP反应次数成比例，可用于功能上验证单甲基组蛋白H3(Lys9)相关染色质的沉淀。

约17 kDa的单甲基组蛋白H3

识别位点：a.a. 1-18

该单甲基组蛋白H3(Lys9)纯化抗体由对应组蛋白H3 1-18氨基酸的合成肽（Lys9单甲基化）免疫获得。

染色质免疫沉淀：
采用2 µg的正常小鼠IgG或抗单甲基组蛋白H3(Lys9)抗体和Magna ChIP G（目录号17-611）试剂盒，对HeLa细胞来源的、超声处理的染色质（每次IP需1 X 10⁶细胞）进行染色质免疫沉淀。 采用GAPDH编码区引物和GAPDH启动子区对照引物，经qPCR验证单甲基组蛋白H3(Lys9)相关DNA片段的成功免疫沉淀（请参见图）。数据表示为每个IP样本扩增子值相对于染色质输入(input)扩增子值的百分比(Percent Input)，ChIP样本如图所示。
请参阅EZ-Magna A ChIP（目录号17-408）或EZ-ChIP（目录号17-371）方案以获取实验详细信息。

蛋白质印迹分析：
前一批次的代表性数据。 将HeLa细胞酸提取物（泳道1）电泳分离，转印至PVDF膜，用抗单甲基组蛋白H3(Lys9)抗体(0.5 μg/mL)检测。
用HRP标记的山羊抗小鼠二抗（目录号AP124P）和化学发光检测系统对蛋白显色（如图）。

研究子类别
染色质生物学

研究类别
表观遗传学&核功能

该ChIPAb+验证抗体&引物试剂套装包含抗体、相应IgG阴性对照抗体&PCR对照引物（检测已知阳性位点）。

识别Lys9单甲基化的组蛋白H3，分子量(Mr)17 kDa。

该免疫原序列在广泛的动植物物种中是相同的。

25次测定/试剂盒，约2 μg/染色质免疫沉淀

抗单甲基组蛋白H3(Lys9)抗体（小鼠单克隆IgG2aқ，克隆号CMA306）。一个小瓶，包含50 μg蛋白G纯化抗体，溶于50 μL PBS（含0.05%叠氮化钠）中。 储存于-20°C。

正常小鼠IgG。两个小瓶，包含25 μg纯化小鼠IgG，溶于25 μL储存缓冲液（含0.1%叠氮化钠）中。储存于-20°C。

ChIP引物，GAPDH编码区。一个小瓶，75 μL，人GAPDH编码区特定引物各5 μM。在-20°C下储存。
正向：GGC TCC CAC CTT TCT CAT CC
REV: GGC CAT CCA CAG TCT TCT GG

自收到之日起在-20°C可稳定保存1年。解冻后分装，避免冻融循环。

对照
包括阴性对照小鼠IgG抗体和对人GAPDH编码区特异性的对照引物。

染色质免疫沉淀：
使用2 µg正常小鼠IgG或抗单甲基组蛋白H3(Lys9)抗体和Magna ChIP G（目录号17-611）试剂盒，对从HeLa细胞超声制备的染色质（每次IP需1 X 10⁶细胞）进行染色质免疫沉淀。 使用ChIP引物（GAPDH编码区）通过qPCR验证了单甲基组蛋白H3(Lys9)作用DNA片段的成功免疫沉淀（请参见图）。
有关实验详细信息，请参阅EZ-Magna G ChIP（目录号17-409）或EZ-ChIP（目录号17-371）方案。

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