抗肌动蛋白抗体，克隆C4

肌动蛋白是普遍存在的真核蛋白，可作为细胞骨架微丝的多功能基本构件。它们在广泛的细胞过程中起关键作用，包括细胞分裂，细胞迁移，染色质重塑，转录调节和囊泡运输。这些功能归因于它们形成细丝的能力，细丝可以根据细胞的需要快速组装和拆卸。在哺乳动物中已经报道了至少六种不同的肌动蛋白类型。尽管肌动蛋白显示约90％的整体序列同源性，但亚型确实显示出空间、时间和组织特异性表达模式，并且在其 18 个 N 末端残基中仅发现 50-60％ 的同源性。β和γ-肌动蛋白，也称为细胞质肌动蛋白，在高等动物中高度保守，并且主要在控制细胞结构的非肌肉细胞中表达。胞吐作用和运动性。它们是几乎相同的蛋白质，仅在N端区域的四个氨基酸不同。其他四种肌动蛋白亚型通常存在于特定的成人肌肉组织类型中。α-心肌肌动蛋白和α-骨骼肌肌动蛋白分别在横纹心肌和骨骼肌中表达。α和γ肌动蛋白分别主要存在于血管平滑肌和肠平滑肌中。已经显示，在钙结合条件下，β-肌动蛋白比γ-肌动蛋白表现出更多的动态行为，具有更高的聚合和解聚速率。而且，β-肌动蛋白和γ-肌动蛋白可以容易地共聚，并且所得到的长丝表现出聚合和解聚速率，其取决于β-肌动蛋白与γ-肌动蛋白的比例（Lessard, JL.,et al.(1988).Cell Motility Cytoskeleton 10(3); 349-362.

MAB1501R是一种泛肌动蛋白抗体，与肌动蛋白高度保守区域的一个表位结合；因此，该抗体可与vertabrate肌动蛋白的6种全部亚型发生反应（Lessard，1988）。与球状（G）和丝状（F）形式的肌动蛋白反应，并且不干扰肌动蛋白聚合形成细丝，其比例高达每两个肌动蛋白单体中一种抗体。但是，当以较低的抗体与肌动蛋白比例使用时，该抗体确实会增加聚合程度。除了标记肌管外，抗肌动蛋白可以染色成肌细胞和成纤维细胞。尽管克隆C4被制备为鸡胗肌肌动蛋白的抗体，但它与全部脊椎动物的肌动蛋白以及盘基网柄菌和多头绒泡菌肌动蛋白反应（Lessard，1988）。

迄今为止，具有肌动蛋白形式的全部动物物种和细胞类型通过间接免疫荧光或免疫印迹（包括植物肌动蛋白）反应。

免疫细胞化学：
使用先前批次的10 μg/mL稀释液（甲醇固定的小鼠3T3细胞）。

免疫组织化学：
将先前批次的10μg/ml稀释液用于石蜡包埋、4%甲醛、3%戊二醛、甲胂酸钠处理的切片{参见Luciano, L et al. 2003}。

ELISA：
先前的批次显示出与细胞质肌动蛋白强烈反应，并且显示出与砂囊，骨骼，动脉和心脏肌动蛋白的显著结合。还显示出与盘基网柄菌和多头绒泡菌的显著结合。

蛋白质印迹：
1-20 µg/ml。在进行SDS-PAGE的肌肉匀浆上，与骨骼，心脏，砂囊和主动脉组织中存在的43 kD蛋白相对均匀地反应。似乎与这些制剂中发现的肌动蛋白的全部亚型反应，并显示与骨骼肌、心肌和动脉肌肉中发现的α-肌动蛋白强烈反应（Otey，1987）。

免疫组化：
10µg/ml石蜡包埋、4%甲醛、3%戊二醛、甲胂酸钠处理的切片{参见Luciano，L et al.2003}。

最佳工作稀释度必须由最终用户进行确定。

该抗肌动蛋白抗体（克隆C4）经验证可用于ELISA、IC、IH、IH（P）、WB检测肌动蛋白，已发表超过70篇引文。

已通过蛋白质印迹对HeLa裂解物进行了常规评估。

蛋白质印迹分析：
该批次已以1：1000的稀释度在10 μg HeLa裂解物中检测到肌动蛋白。

43kda

在0.1 M Tris-甘氨酸（pH值7.4）150mM NaCl和0.05%NaN3中纯化的蛋白G。

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