生物来源
mouse
质量水平
偶联物
unconjugated
抗体形式
purified immunoglobulin
抗体产品类型
primary antibodies
克隆
D4B5, monoclonal
种属反应性
human
制造商/商品名称
Chemicon®
技术
ELISA: suitable
immunohistochemistry: suitable (paraffin)
western blot: suitable
同位素/亚型
IgG1
NCBI登记号
UniProt登记号
运输
wet ice
靶向翻译后修饰
unmodified
基因信息
human ... LAMC2(3918)
一般描述
150 kDa(前体形式)和105 kDa(成熟形式)
层粘连蛋白是由α,β和γ异源三聚体链组成的基底膜,细胞外基质糖蛋白。 五个α链,三个β链和两个γ链的不同组合形成至少12个层粘连蛋白亚型。 层粘连蛋白5(LN5)由层粘连蛋白α3,β3和γ2链组成,是表皮角质形成细胞半桥粒结构下面锚定细丝的高度保守成分。 LN5基因(LAMA3,LAMB3和LAMC2)的突变或缺失与大疱性表皮松解(一种致命的皮肤水泡疾病)有关。 LN5可通过与整联蛋白α3/β1,α6/β4和VII型胶原结合来稳定皮肤的表皮/真皮连接,并在多种细胞类型(包括上皮细胞,成纤维细胞,神经元和白细胞)的锚定和运动中起关键作用。相比于纤维连接蛋白、胶原蛋白或玻连蛋白,上皮来源的细胞会更快地粘附在层粘连蛋白-5上,并且会在更大程度上扩散。最近,层粘连蛋白5作为可刺激迁移的癌细胞的底物引起了人们的关注,因为它已在几种类型的人类癌症的浸润性癌症组织的前沿被检测到(Niki,et al.,2002;Lohi,et al.,2001)。
免疫原
表达为GST融合蛋白的人层粘连蛋白5γ2链(III结构域)的氨基酸残基382-608。
应用
抗层粘连蛋白-5(γ2链)抗体,克隆D4B5是一种抗层粘连蛋白-5(γ2链)的抗体,用于ELISA,IH(P)&WB。
研究子类别
ECM 蛋白
ECM 蛋白
研究类别
细胞结构
细胞结构
蛋白质印迹:建议5ug/ml;仅在PBS或TBS中稀释抗体,不在封闭液中稀释;建议使用纯化的化合物进行阻断。
石蜡切片的免疫组化: 建议5-10ug/ml。 不要过度修复。 最好使用4%或2%的轻PFA。 将4mm厚的石蜡切片脱蜡,再水化并浸入含有0.3%过氧化氢的甲醇中以灭活内在过氧化物酶,然后在室温(0.01-0.05%)下用蛋白酶XXIV(Sigma)处理15分钟。不要使用胰蛋白酶。抗体在37°C下培养1小时,然后用DAB检测和观察二抗(Mizushima et al.1998)。 不要将单克隆抗体置于血清块中,因为血清包含层粘连蛋白5,会结合并干扰抗体。 使用BSA或其他此类培养基代替。
在下列组织的基底膜中可见强阳性染色:皮肤,食道,肺和肾脏。在胃,小肠,脾脏,胸腺,前列腺和卵巢中也可见阳性染色。甲状腺,睾丸,骨骼肌和心肌的LN5染色均为阴性。
α2β1整联蛋白与层粘连蛋白5(40μg/ml)结合的抑制(Decline &Rousselle 2000)。
ELISA最佳工作稀释度必须由最终用户确定。
石蜡切片的免疫组化: 建议5-10ug/ml。 不要过度修复。 最好使用4%或2%的轻PFA。 将4mm厚的石蜡切片脱蜡,再水化并浸入含有0.3%过氧化氢的甲醇中以灭活内在过氧化物酶,然后在室温(0.01-0.05%)下用蛋白酶XXIV(Sigma)处理15分钟。不要使用胰蛋白酶。抗体在37°C下培养1小时,然后用DAB检测和观察二抗(Mizushima et al.1998)。 不要将单克隆抗体置于血清块中,因为血清包含层粘连蛋白5,会结合并干扰抗体。 使用BSA或其他此类培养基代替。
在下列组织的基底膜中可见强阳性染色:皮肤,食道,肺和肾脏。在胃,小肠,脾脏,胸腺,前列腺和卵巢中也可见阳性染色。甲状腺,睾丸,骨骼肌和心肌的LN5染色均为阴性。
α2β1整联蛋白与层粘连蛋白5(40μg/ml)结合的抑制(Decline &Rousselle 2000)。
ELISA最佳工作稀释度必须由最终用户确定。
生化/生理作用
开发了针对表达为GST融合蛋白的人层粘连蛋白5γ2链(III结构域)的氨基酸残基382-608的单克隆抗体MAB19562。 该抗体可识别层粘连蛋白-5的150 kDa(前体形式)和105 kDa(成熟形式)链蛋白。 预期与其他层粘连蛋白类型没有反应性,因为层粘连蛋白的γ2链是层粘连蛋白5特有的。
外形
形式:纯化
纯化的蛋白 A
蛋白 A 纯化的小鼠免疫球蛋白,溶于 20 mM 磷酸钠,250 mM NaCl,pH.7.6 和 0.1% 叠氮化钠中作为防腐剂的溶液。
制备说明
自发运之日起,在 2–8°C 条件下可稳定保存 1 年等分以避免反复冻融。为了最大程度地回收产品,在融化后和取下盖子之前,将原始样品瓶进行离心。
分析说明
对照
人胰腺肿瘤组织、人乳腺癌组织或A-431全细胞裂解物
人胰腺肿瘤组织、人乳腺癌组织或A-431全细胞裂解物
已通过蛋白质印迹对重组层粘连蛋白-5进行了评估。
蛋白质印迹分析:该抗体以1:500-1:2000稀释度在10µ g人重组层粘连蛋白5中检测到层粘连蛋白5,γ2链。
蛋白质印迹分析:该抗体以1:500-1:2000稀释度在10µ g人重组层粘连蛋白5中检测到层粘连蛋白5,γ2链。
其他说明
浓度:请参考批次特异性浓缩物的分析证书。
法律信息
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
免责声明
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