NeuN抗体（神经元核；克隆A60）特异性识别DNA结合的神经元特异性蛋白NeuN，该蛋白存在于所有检验的脊椎动物的大多数CNS和PNS神经元细胞类型中。NeuN蛋白的分布明显局限于胎儿和成人大脑中的神经元细胞核、核周体和一些近端神经元突起，但有些神经元在所有年龄段都不能被NeuN识别：例如，INL视网膜细胞、Cajal Retzius细胞、Purkinje细胞、下橄榄核和齿状核神经元以及交感神经节细胞（Mullen等人，1992；Wolf等人，1996）。免疫组织化学可检测到的NeuN蛋白首先出现在与神经元退出细胞周期和/或神经元终末分化开始相对应的发育时间点（Mullen等人，1992）。免疫反应性出现在小鼠神经管中的E9.5附近，并在E12.5的整个发育中的神经系统中广泛存在。强烈的核染色表明核调节蛋白功能。但是，目前尚无关于NeuN蛋白抗原是否在远端细胞质中具有功能或在转运回细胞核之前仅在那里合成的证据。从纯化的细胞核和全脑提取物中分离的蛋白质在免疫印迹上没有发现差异（Mullen等人，1992）。

脊椎动物神经元特异性核蛋白，称为NeuN（神经核）。MAB377B与小鼠整个神经系统中的大多数神经元细胞类型反应，包括小脑、大脑皮层、海马、丘脑、脊髓和周围神经系统中的神经元，包括背根神经节、交感神经链神经节和肠神经节。 免疫组织化学染色主要在神经元的细胞核中，细胞质中的染色较浅。 少数不与MAB377B反应的细胞类型包括浦肯野细胞、二尖瓣细胞和感光细胞。 在发育上，神经元有丝分裂后不久首先观察到免疫反应性，在增生区未观察到染色。 该抗体是原代培养和视黄酸刺激的P19细胞的极佳神经元标志物。 它还可用于识别移植物中的神经元。

小鼠脑中纯化的细胞核

免疫细胞化学分析：
使用了一个先前批次的1:10-1:500稀释液。培养中的神经元应使用0.1% Triton X-100渗透。所有一抗稀释均应使用仅包含缓冲液和一抗的简单溶液进行，而无需过量的蛋白块或去污剂。

对于使用小鼠单克隆抗体的双重标记研究，抗体孵育应与MAB377B连续进行。在与mAb377B孵育之前，应首先用抗小鼠二抗检测第一种小鼠单克隆抗体。在MAB377B孵育之前，可以通过与1%小鼠血清孵育来阻断过量的抗小鼠IgG。通过链霉亲和素检测生物素化NeuN单克隆抗体。在某些情况下，可能需要在免疫组织化学之前用抗生物素蛋白预处理组织以阻断过量的生物素（Wood和Warnke，1981）。

免疫组织化学：
1:200-1:2,000。该抗体在聚酯蜡包埋的组织上效果最好，但在较低的工作稀释度下也能在石蜡包埋的组织上发挥作用。该抗体与甲醛固定剂配合使用效果良好。已成功使用柠檬酸和微波预处理（Sarnat，1998）。

蛋白质印迹分析：
该抗体的一个先前批次被用于蛋白质印迹。可识别46-48 kDa范围内的2-3个条带，并可能识别约66 kDa的另一个条带。

最佳工作稀释度必须由最终使用者进行确定。

研究子类别
神经元&神经胶质标志物

研究类别
神经科学

经验证，该抗NeuN抗体（克隆A60，生物素偶联）可用于IC、IH、IH(P)、WB检测NeuN。

通过免疫组织化学对脑组织进行常规评估。

免疫组织化学（石蜡）分析：
大鼠小脑的NeuN（目录号MAB377B）染色模式/形态。 用柠檬酸盐（pH 6.0）预处理的组织。使用带有HRP-DAB的IHC-Select Detection将这批抗体稀释至1:100。 免疫反应性表现为颗粒层神经元的核染色。 请注意，在浦肯野细胞核中未检测到信号。
使用柠檬酸盐缓冲液（pH 6.0）进行最佳染色，表位修复：大鼠小脑

46-48 kDa

纯化的小鼠单克隆IgG1，溶于含0.01 M PBS pH 7.1、0.1%叠氮化钠和15 mg/mL BSA作为稳定剂的缓冲液中。

纯化蛋白A

自接收之日起，在2-8ºC下可稳定保存1年。

对照
脑组织，整个成人神经系统中的大多数神经元细胞类型

浓度：关于批次特定浓度请参见检验报告。

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