抗-BrdU抗体，克隆131-14871

胸苷类似物5-溴-2′-脱氧尿苷（BrdU）是用于细胞增殖测定和凋亡细胞检测的常用试剂。BrdU很容易掺入新合成的DNA中，标志物已经经历细胞周期S期的细胞，从而充当增殖细胞的标志物。

抗BrdU抗体（克隆131-14871）是用于检测溴脱氧尿苷（也称为BrdU）的小鼠单克隆抗体，&已在FC、IHC、IHC(P)中进行了验证。 该溴脱氧尿苷抗体预期在所有物种中均发生反应。

研究子类别
细胞周期、DNA复制&修复

研究类别
表观遗传学&核功能

针对肾、十二指肠和肝组织去石蜡切片的免疫组织化学：1:1000-1:1250。

针对100 μL 106个细胞的流式细胞术: 1:5000。

最佳稀释度必须由最终用户确定。

免疫组织化学程序

用于石蜡包埋组织切片

染色程序:

1.在二甲苯中脱蜡切片3 × 5分钟。树脂包埋或GMA（甲基丙烯酸乙二醇酯、甲基丙烯酸2-羟乙酯）处理的切片由于没有石蜡，因此无需脱蜡。

2.每隔2分钟将载玻片置于梯度乙醇（100、95、90%）水溶液中，并风干。（GMA部分略）

3.用PAP笔或金刚石笔圈出部分，以识别并彻底干燥。

4.对于GMA或树脂切片，将载玻片置于0.5% Tween/PBS（pH 7.6）中29分钟。

5.在预热（40°C）的1N HCl中孵育1小时。

6.用PBS（pH 7.6）清洗3 × 3分钟。此时可以保存切片，并在第二天继续进行该程序。

7.对于NBF（正常缓冲福尔马林）固定的组织，在室温下于1X胰蛋白酶溶液（0.02-0.05% w/v，预热至40°C）中孵育20分钟，对于Carnoy′s固定的组织，孵育10分钟。

8.用PBS（pH 7.6）清洗3 × 5分钟。

9.将切片在1% H2O2（10 mL 30% H2O2 in 290 mL甲醇）中孵育20分钟，或将GMA切片在3% H2O2（10 mL 30% H2O2 in 90 mL水）中孵育3分钟。

10.用PBS（pH 7.6）清洗2 × 2分钟。

11.使用Vector ABC试剂盒，在10 mL PBS中加入3滴正常马血清。用该溶液在室温下封闭载玻片20分钟。

12.吸干过量正常马血清的载玻片，并与在PBS/BSA/吐温20中稀释的MAB4072在室温下孵育1小时。

13.用PBS（pH 7.6）清洗3 × 3分钟。

14.向10 mL PBS中加入3滴正常马血清，然后加入1滴生物素化抗体储备液。将玻片与稀释的第二抗体在室温下孵育30分钟。

15.向5 mL PBS中加入2滴试剂A，制备Vectastain ABC试剂。然后向同一混合瓶中加入2滴试剂B。使用前静置约30分钟。

16.用PBS（pH 7.6）清洗3 × 3分钟。

17.在室温下用ABC试剂孵育载玻片30分钟。

18.用PBS（pH 7.6）清洗3 × 3分钟。

19.通过混合等体积的0.02% H2O2（由30%贮备液在蒸馏水中制备）和0.1%DAB（在0.1 M Tris缓冲液（pH 7.2）中制备）制备底物。H2O2应从浓缩储备液中新鲜制备。由于许多过氧化物底物在H2O2存在下或暴露于光线下不稳定，因此应在使用前准备底物。由于DAB是一种可疑的致癌物，因此在处理和处置所有过氧化物酶底物时应格外小心。

20.用DAB底物染色载玻片2-5分钟。

21.用蒸馏水清洗2 × 2分钟。

22.用苏木精复染，通过二甲苯脱水，然后盖上盖玻片。

识别BrdU（溴脱氧尿苷）。

形式：纯化

液体形式，用于含150 mM NaCl和0.1%叠氮化钠的10 mM磷酸盐缓冲液（pH 7.4）中。

纯化蛋白A

自运输之日起，在-20°C下可保存2年。分装保存以避免反复冻融。为了最大程度地回收产品，需在融化后和取下盖子之前将原始样品管进行离心。

对照
Brdu处理细胞

浓度：关于批次特定浓度请参见检验报告。

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