抗-泛腺苷二磷酸核糖结合试剂

取决于靶蛋白和ADP-核糖基化程度的变化。

目录号MABE1016，抗泛ADP-核糖结合试剂，是一种与兔Fc标记融合的带有His标记的重组蛋白，在大肠杆菌的Rosetta（DE3）pLysS菌株中表达并纯化（目录号70956）。抗泛ADP-核糖结合试剂可用于膜上单和多ADP-核糖基化蛋白的亲和力检测，其方式类似于基于抗体的蛋白质印迹和斑点印迹分析，兔Fc标记可显示与偶联的抗兔二抗结合。Fc标记还允许将抗泛ADP-核糖结合试剂捕获在蛋白A树脂上，以进行亲和力下拉应用。

抗聚ADP核糖结合试剂是一种可选择性结合单聚ADP核糖和多聚ADP核糖的试剂，用于蛋白质印迹、免疫细胞化学和斑点印迹。

斑点印迹法特异性分析：该试剂可检测重组PARP3蛋白上的单(ADPR)，以及重组PARP1重组蛋白上的单(ADPR)和聚(ADPR)（Lee Kraus，University of Texas Southwestern Medical Center）。

免疫沉淀分析：抗泛ADP-核糖结合试剂的一个代表性批次免疫沉淀来自细胞核提取物的ADP-核糖基化蛋白（Lee Kraus，University of Texas Southwestern）。

蛋白质印迹分析：在存在NAD+或各种NAD+类似物的情况下，一个代表性批次检测到PARP1/2/3和突变体的自动ADP-核糖基化活性（Gibson，B.A.，et al.（2016）.Science.353（6294）:45-50）。

蛋白质印迹分析：一个代表性批次在无细胞酶促反应中检测到PARP1催化的NELF-E ADP-核糖基化，以及HEK293T细胞中外源表达的带有FLAG标记的NELF-E的ADP-核糖基化。PARP抑制剂PJ34或P-TEFb/CDK9抑制剂黄酮哌啶醇处理降低了细胞NELF-E ADP-核糖基化水平（Gibson，B.A.，et al.（2016）.Science.353（6294）:45-50）。

研究子类别
一般翻译后修饰

研究类别
表观遗传学&核功能

聚（ADP-核糖）和单（ADP-核糖）

Ni-NTA琼脂糖

形式：纯化

通过Ni-NTA琼脂糖从大肠杆菌中纯化。在含有10 mM Tris pH 7.5、0.2 M NaC、10%甘油、10 mM咪唑、1 mM PMSF、1 mM β-巯基乙醇、10%甘油的缓冲液中提供，不含防腐剂。

自接收之日起，在-80°C下可稳定保存1年。
处理建议: 收到后，在取下瓶盖之前，将小瓶离心并轻轻混合溶液。分装至微量离心管中，并储存于-80°C。避免反复冻融循环，否则可能损坏IgG并影响产品性能。

通过蛋白质印迹法对ADP-核糖基化的PARP1和PARP3重组蛋白进行评估。

蛋白质印迹分析：该试剂检测到重组PARP3蛋白上的单(ADPR)，以及重组PARP1蛋白上的单(ADPR)和聚(ADPR)（Lee Kraus, University of Texas Southwestern Medical Center）。

浓度：请参考特定批次的数据表。

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