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Merck
CN

04536282001

Roche

重组DNase I

grade I, from bovine pancreas, expressed in Pichia pastoris

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About This Item

UNSPSC代码:
12352204
NACRES:
NA.28

生物来源

bovine pancreas

质量水平

重组

expressed in Pichia pastoris

表单

lyophilized

比活

(>10,000 U/bottle according to Kunitz (+25°C; DNA as substrate).)

分子量

39  kDa

包装

pkg of 2 × 10,000 U

制造商/商品名称

Roche

浓度

≥70-90%

技术

protein extraction: suitable

颜色

white to light yellow

溶解性

water: soluble

适用性

suitable for molecular biology

NCBI登记号

UniProt登记号

应用

sample preparation

异质活性

Proteases, none detected
RNase, none detected

储存温度

2-8°C

基因信息

bovine ... DNASE1(282217)

相关类别

一般描述

属性:它是一种双链特异性内切核酸酶,需要二价阳离子激发最大活性。
活性:根据Kunitz,每瓶含有10,000U(+ 25°C;DNA作为底物)。
单位定义:一个单位表示在测定条件下导致吸光度以0.001 /min的速率增加的酶活力。
降解单链和双链 DNA;双链活性需要二价阳离子才能获得最大化。

应用

  • DNase I(重组,I级)可用于:在蛋白质分离过程中消除DNA
  • 染色质结构分析
  • 在样品制备过程中消除DNA

特点和优势

内容物
冻干粉

单位定义

根据Kunitz,一个酶活力单位表示在测定条件下,在1ml中,导致260nm处的吸光度以0.001 /min的速率增加。体积活性是在0.1M乙酸钠,5mM MgSO4,pH 5.0条件下进行测定。
检测混合物:将小牛胸腺DNA(100 μg)与20至50U DNase I在+ 25°C下进行孵育。
对260nm处吸光度的增加进行测定。

信息说明:由于Kunitz检测具有高重复性和灵敏度,因此根据Kunitz检测,选择这些条件用于活性测定。当将该酶用于正常实验目的时,罗氏公司建议使用适合特定应用的孵育缓冲液,例如,在标准文献中所提到的缓冲液(Sambrook et al., Curr.Prot.Mol.Biol., etc.)。

制备说明

激活剂:该酶需要二价阳离子激发最大活性。反应的特异性取决于所用阳离子的性质。在Mg2+存在的条件下,DNase I可在dsDNA上造成单链缺口,而在Mn2+存在的情况下,该酶可引起双链断裂。
储存条件(工作液):长期保存溶解酶

通常推荐溶解DNase I的溶剂是水。当DNase I在水中重构时,溶液可在2°C至8 °C 下保存2天,在-15°C至-20 °C 下保存1个月。为获得最佳效果,请制备适当的等分试样,避免反复冻融。然而,如需长期储存,则请将DNase I小心地溶解于下列缓冲液。在缓冲液1中,酶可稳定保存数周。如果溶解在缓冲液2、3或4中且在建议的温度下储存,则酶将稳定保存至少18个月。

信息说明:溶解时不要对酶进行涡旋混匀!
缓冲液1:20mM Tris-HCl、20mM MgCl2、5mM CaCl2、0.1mM二硫赤藓糖醇、0.1mM EDTA、50% (v/v)甘油,pH 8。此溶液储存在-15°C至-25°C条件下,不会冻结,且可稳定保存数周。
缓冲液2:20mM Tris-HCl、50mM NaCl、1mM二硫赤藓糖醇、100μg/mL BSA、50% 甘油(v / v),pH 7.6。此溶液可在-15°C至-25°C条件下最长储存18个月,且不会冻结。
缓冲液3:20mM Tris-HCl、1mM MgCl2、50% (w/v)甘油,pH 7.5。此溶液可在-15°C至-25°C条件下最长储存18个月,且不会冻结。
缓冲液4:20mM Tris-HCl、1mM MgCl2,pH 7.5。等量分装(例如,10 μ),在干冰上对等分试样进行快速冷冻,并在-60°C或更低温度下最长储存18个月。仅解冻每个实验所需用量。不可冷冻。弃去解冻后剩余的全部溶液。

储存及稳定性

密闭。干燥。

其他说明

仅用于生命科学研究。不用于诊断操作。

象形图

Health hazard

警示用语:

Danger

危险声明

危险分类

Resp. Sens. 1 - Skin Sens. 1

储存分类代码

11 - Combustible Solids

WGK

WGK 1

闪点(°F)

does not flash

闪点(°C)

does not flash


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