recombinant
expressed in E. coli
Quality Segment
packaging
vial of 50 μL
concentration
20 ng/μL in TE buffer; DNA (1μg of plasmid DNA)
promoter
Promoter name: CMV
reporter gene
RFP
shipped in
dry ice
storage temp.
−20°C
General description
Cas9表达质粒使用CMV启动子实现Cas9强瞬时表达。您可以使用MluI和NheI酶切将CMV替换为其它启动子。而且还可使用XbaI酶切将Cas9表达质粒线性化，以实现基于T7的mRNA表达。加入可与Cas9核酸酶共同表达的荧光团，可在转染成功后更易于观察。
Application
功能性基因组学/靶点验证
- 在多种细胞系中进行基因敲除
- 对不适合于RNAi的基因进行完全敲除
- 建立基因敲入细胞系，将启动子、融合标签或报告基因整合到内源性基因中
Biochem/physiol Actions
CRISPR/Cas 是细菌和古细菌的一种防御系统，可用来对抗入侵的病毒和质粒。来自酿脓链球菌的II型CRISPR/Cas系统包含两种分子元件，即一个Cas9蛋白和一个非编码向导RNA（gRNA），该系统经过基因改造而被用于真核系统中。Cas9 核酸内切酶可在单个gRNA的引导下，在指定基因组位置上引入DNA双链断裂（DSB）。与锌指核酸酶（ZFN）诱导的DSB相似，细胞随后会激活内源性DNA修复程序，即非同源性末端接合（NHEJ）或同源重组修复机制（HDR），对目标DSB进行修复。
Physical form
Sigma Cas9-2A-RFP 质粒的浓度为50ng/μl 的溶液20μl。
Other Notes
1管包含1μg Cas9-2A-RFP 质粒
请注意，该产品不含向导RNA序列。向导RNA必须通过定制CRISPR产品选项卡单独购买。
请注意，该产品不含向导RNA序列。向导RNA必须通过定制CRISPR产品选项卡单独购买。
为了介导DNA双链断裂，必须与U6-gRNA质粒一起使用。
文献中使用的标准转染浓度范围为≥1.0 ug/μl且≤5 uL的Cas9质粒结合≥1.0 ug/μl且≤5 ul的U6-gRNA质粒。（上述所有浓度均假设是对0.5~1百万个细胞进行核转染）。
文献中使用的标准转染浓度范围为≥1.0 ug/μl且≤5 uL的Cas9质粒结合≥1.0 ug/μl且≤5 ul的U6-gRNA质粒。（上述所有浓度均假设是对0.5~1百万个细胞进行核转染）。
Legal Information
存储类别
10 - Combustible liquids
wgk
nwg
flash_point_f
Not applicable
flash_point_c
Not applicable