recombinant
expressed in E. coli
Quality Segment
packaging
vial of 50 μL
concentration
20 ng/μL in TE buffer; DNA (1μg of plasmid DNA)
application(s)
CRISPR
shipped in
dry ice
storage temp.
−20°C
General description
一种基于非活性Cas9或dCas9与人类E1A结合蛋白p300的组蛋白乙酰化（HAT）催化核心结构域融合的基因激活系统。相较于dCas9-VP64或其它类似的基因激活机制，带有p300结构域的dCas9-p300 CRISPR Gene Activator代表了一种截然不同的基因激活机制。p300组蛋白乙酰化酶可将DNA从异染色质状态释放出来，并通过细胞内源机制维持基因持续高量的表达，从而开启了一条基因转录高速公路。Cas9表达质粒使用CMV启动子实现Cas9强瞬时表达。您可以使用MluI和NheI酶切将CMV替换为其它启动子。而且还可使用XbaI酶切将Cas9表达质粒线性化，以实现基于T7的mRNA表达。
Application
- 功能基因组/靶标确认表观遗传修饰
- 转录激活
Features and Benefits
- Sigma CRISPR dCas9p300质粒共表达p300-HAT和GFP可以方便地监测其在目的细胞内的传递和表达情况（图1）。gRNA可以成功介导核酸酶缺失的Cas9(dCas9)融合到p300HAT的催化结构域上，从而提升组蛋白乙酰化和内源基因的表达水平。相较于dCas9-VP64或其它类似基因激活基序，dCas9-p300组蛋白乙酰化方法代表着一种截然不同的基因激活机制。
Other Notes
必须与U6-gRNA表达质粒配套使用
每管包含1ug dCas9-p300质粒。
存储类别
10 - Combustible liquids
wgk
nwg
flash_point_f
Not applicable
flash_point_c
Not applicable