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安全信息

DUO92003

Sigma-Aldrich

Duolink® 原位PLA® 探针抗山羊PLUS

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别名:
in situ Proximity Ligation Assay Kit, Protein Protein Interaction Kit
NACRES:
NA.32

生物来源

donkey (polyclonal)

质量水平

200

抗体形式

affinity purified immunoglobulin (secondary antibody)

抗体产品类型

primary antibodies

产品线

Duolink®

种属反应性

goat

技术

immunofluorescence: suitable
proximity ligation assay: suitable

适用性

suitable for brightfield
suitable for fluorescence

运输

wet ice

储存温度

2-8°C

相关类别

应用

Duolink®邻位连接检测（PLA®）可在单分子水平上对固定细胞和组织样品的蛋白质相互作用、翻译后修饰和蛋白质表达水平进行内源性检测。

本品可用于Duolink®原位荧光实验方案和Duolink®原位明场实验方案，具体取决于所用的检测试剂。

请访问我们的Duolink® PLA资源中心，了解有关如何运行Duolink®实验、应用程序、故障排除等的信息。

为完成完整的Duolink® PLA 原位实验，您将需要能识别两个目标表位的一抗（经验证的PLA、IHC、ICC或IF）。其他必需试剂包括来自不同物种的一对PLA探针（一个PLUS和一个MINUS）、检测试剂、洗涤缓冲液和封固剂。请注意，一抗必须来自与Duolink® PLA探针相同的物种。使用标准免疫荧光检测设备进行分析。还提供了用于明场检测的HRP。

特异性
PLA探针抗山羊能够与全分子山羊IgG和其他山羊免疫球蛋白的轻链反应。PLA探针抗山羊可能与绵羊抗体发生交叉反应，但与鸡、豚鼠、叙利亚仓鼠、马、人、小鼠、兔和大鼠的血清蛋白几乎无交叉反应。使用本品时，必须同时使用来自不同物种的MINUS探针。有关详细信息，请参阅产品选择指南。


应用说明
两种一抗需要来自于不同物种。通过标准免疫荧光（IF）、免疫组织化学（IHC）或免疫细胞化学（ICC）检测来检测一抗（IgG类，单克隆或多克隆），以确定最佳的固定、封闭和滴度条件。Duolink® PLA原位试剂适用于固定细胞、细胞离心涂片细胞、载玻片上生长的细胞、福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）样品或组织（新鲜或冷冻）。无最少细胞数量限制。

请让我们助您完成工作，了解有关我们的定制服务计划的更多信息，加速您的Duolink®项目

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特异性
PLA抗山羊探针可与全分子山羊IgG和其它山羊免疫球蛋白的轻链反应。抗山羊PLA探针可与绵羊抗体交叉反应，但与鸡、豚鼠、叙利亚仓鼠（Syrian hamster）、马、人、小鼠、兔和大鼠血清蛋白具有极小的交叉反应性。本产品须配合不同物种的MINUS探针使用。请参见我们的 产品选择指南 以获得更多信息。

应用说明
需要使用在不同物种中产生的两种一抗。在标准免疫荧光（IF）、免疫组织化学（IHC）或免疫细胞化学（ICC）检测中测试您的一抗（IgG类，单克隆或多克隆），以确定最佳的固定、封闭和滴度条件。Duolink® PLA 原位试剂适用于固定细胞、细胞离心涂片、载玻片上生长的细胞、福尔马林固定石蜡包埋 (FFPE) 或组织（新鲜或冷冻）。无最小细胞数量要求。

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Duolink®原位PLA®探针抗山羊PLUS已用于原代海马神经元培养物、肠系膜动脉和人恶性黑素瘤细胞系（MEL624）的邻位连接检测。

特点和优势

  • 不需要过表达或基因操纵
  • 特异性高（假阳性较少）
  • 因滚环扩增而具有单分子灵敏度
  • 可进行相对量化
  • 无需特殊设备
  • 比FRET更快、更简单
  • 准确性高于co-IP
  • 结果可直接发表

组分

本品包括以下组分：
  • 5x PLA探针抗山羊PLUS - 与寡核苷酸PLUS偶联的驴抗山羊二抗
  • 1x 封闭液 - 用于封闭样品的试剂
  • 1x抗体稀释液 - 用于稀释PLA探针和一抗
有关更多信息，参见数据表。

法律信息

Duolink is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
PLA is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

储存分类代码

10 - Combustible liquids

WGK

WGK 3

法规信息

含少量动物源组分生物产品
常规特殊物品

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  4. What is the Department of Transportation shipping information for this product?

    Transportation information can be found in Section 14 of the product's (M)SDS.To access the shipping information for this material, use the link on the product detail page for the product. 

  5. What epitope on the antibody is recognized by the Duolink PLA Probes?

    The Duolink PLA Probes offered are donkey polyclonal antibodies directed to the whole molecule (heavy and light chains).  They are affinity purified.  The same polyclonal antibody is conjugated to the Plus and Minus Oligos. The Plus and Minus probes can be used together (to detect a single antibody) since they can recognize multiple sites.  The anti-mouse IgG PLA labeled antibodies may cross-react with rat but this is not consistent. Do not use this product with rat antibodies.  It is best to label anti-rat secondary antibodies with the Duolink Probemaker kit.The anti-goat IgG PLA labeled antibodies have cross-reactivity with sheep IgG and can be recommended for this application.

  6. Has Duolink been used for detection of changes in protein expression?

    The following reference cites the use of Duolink to detect changes in protein expression in Human. Raizer et al., Cancer 2010;116:5297-305

  7. How many reactions can be performed with the Duolink® In Situ Starter Kit?

    All of the starter kits for the Duolink product line will perform 30 reactions using 40 ul per reaction.    DUO92101 - Duolink® In Situ Red Starter Kit Mouse/Rabbit    DUO92102 - Duolink® In Situ Orange Starter Kit Mouse/Rabbit    DUO92103 - Duolink® In Situ Red Starter Kit Mouse/Goat    DUO92104 - Duolink® In Situ Orange Starter Kit Mouse/Goat    DUO92105 - Duolink® In Situ Red Starter Kit Goat/Rabbit    DUO92106 - Duolink® In Situ Orange Starter Kit Goat/Rabbit

  8. My question is not addressed here, how can I contact Technical Service for assistance?

    Ask a Scientist here.

CaMKII regulates intracellular Ca2+ dynamics in native endothelial cells
Toussaint F, et al.
Cell Calcium, 58(3), 275-285 (2015)
Increasing the receptor tyrosine kinase EphB2 prevents amyloid-beta-induced depletion of cell surface glutamate receptors by a mechanism that requires the PDZ-binding motif of EphB2 and neuronal activity
Miyamoto T, et al.
The Journal of Biological Chemistry, 291(4), 1719-1734 (2016)
Targeting ER stress-induced autophagy overcomes BRAF inhibitor resistance in melanoma
Ma XH, et al.
The Journal of Clinical Investigation, 124(3), 1406-1417 (2014)
Roberto Di Maio et al.
Science translational medicine, 10(451) (2018-07-27)
Missense mutations in leucine-rich repeat kinase 2 (LRRK2) cause familial Parkinson's disease (PD). However, a potential role of wild-type LRRK2 in idiopathic PD (iPD) remains unclear. Here, we developed proximity ligation assays to assess Ser1292 phosphorylation of LRRK2 and, separately
Kan V Lu et al.
Cancer cell, 22(1), 21-35 (2012-07-14)
Inhibition of VEGF signaling leads to a proinvasive phenotype in mouse models of glioblastoma multiforme (GBM) and in a subset of GBM patients treated with bevacizumab. Here, we demonstrate that vascular endothelial growth factor (VEGF) directly and negatively regulates tumor
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How to Optimize the Duolink® Proximity Ligation Assay

Things to consider for preparation, setup and execution of the Duolink® assay protocol

如何优化 Duolink® 邻位连接实验

正确地准备、设置和执行 Duolink® PLA 实验方案需要考虑的因素。

Duolink® PLA Troubleshooting Guide

Support information including tips and tricks, frequently asked questions, and basic troubleshooting.

Duolink® PLA故障排除指南

包括建议和技巧、常见问题解答和基本故障排除的支持信息。

实验方案

Duolink® PLA明场实验方案

使用明场显微镜和Duolink® PLA试剂用于检测和定量组织和细胞样品中的个体蛋白质、蛋白质修饰和蛋白质相互作用。

Duolink® PLA Brightfield Protocol

Duolink® PLA reagents enable brightfield detection and quantification of proteins and interactions in tissue samples.

Duolink® PLA Flow Cytometry Protocol

Protocol for use of Duolink® PLA reagents for the detection of individual proteins, protein modifications, and protein-protein interactions within cell populations by flow cytometry.

Duolink®PLA流式检测方案

本实验方案描述如何使用Duolink® PLA邻位连接试剂，通过流式细胞术检测细胞群内的单个蛋白质、蛋白修饰和蛋白相互。

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Duolink® PLA Applications

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Duolink® PLA邻位连接技术的应用

利用邻位连接技术对蛋白质互作、翻译后修饰和低表达蛋白进行检测、定量和成像应用。

我们的科学家团队拥有各种研究领域经验，包括生命科学、材料科学、化学合成、色谱、分析及许多其他领域.

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