Quality Segment
technique(s)
whole genome amplification: suitable
dilution
(WTA)
input
purified RNA
shipped in
wet ice
storage temp.
−20°C
General description
经过优化的WTA2,可对福尔马林固定的石蜡包埋样品(FFPE)和其他受损或降解样本中的RNA进行扩增。全转录组扩增(WTA)技术可在4小时内对ng级的总RNA进行无3′偏差的代表性扩增。扩增产物适用于qPCR、微阵列分析和克隆等应用。WTA2试剂盒含有cDNA文库扩增所需的聚合酶。
Application
完整全转录组扩增试剂盒用于:
- 建立过程控制深度测序同时分析猪粪便中DNA和RNA病毒的实验方案。
- 反转录和cDNA扩增
- 使用免疫捕获PPV颗粒释放的基因组RNA来合成和扩增cDNA库
- 核酸制备和深度测序(提取的核酸随机引物用于cDNA合成)
适于各种下游应用,包括:
- qPCR
- 微阵列分析
- 克隆
Biochem/physiol Actions
WTA2过程包括2个步骤。第一步,使用由拟随机3′端和通用5′端组成的非自身互补引物对样品RNA进行逆转录。在该过程中,被取代的单链将作为引物退火和延伸的新模板。所得OmniPlex cDNA文库由以通用末端序列为侧翼序列、含100-1000个碱基的随机重叠片段组成。第二步,使用WTA2聚合酶和通用末端引物对cDNA文库进行PCR扩增,生成WTA2产物。
Features and Benefits
- 在4小时内实现高达10,000x的扩增,并且手动操作时间低于30分钟
- 仅需20 pg的总RNA模板,即可扩增出适用于微阵列分析的cDNA
- 含有cDNA扩增所需的所有元件
- 实现对表达基因和外显子的线性扩增,无3′或5′偏差
- 有效扩增单细胞或小量RNA,包括来自动物、植物或微生物的mRNA和总RNA。
存储类别
10 - Combustible liquids
wgk
WGK 3