注意:储存温度 - 参见“储存/稳定性”章节了解单个组分的储存条件
DNA甲基化已被充分证明在基因表达的调节中起重要作用。在任何给定的时间内,哺乳动物基因组中都有约70%的总CpG二核苷酸被甲基化。基因组中的低甲基化和超甲基化能够调控基因的表达。测定DNA的甲基化状态是表观遗传学研究的一项重要工具。8,11
已在多种癌症、神经系统疾病、自身免疫性疾病(例如狼疮和心血管疾病)和衰老中都观察到了偏离正常的总体DNA甲基化水平。10
Imprint甲基化DNA定量试剂盒提供了一种可在约半天内完成对整体DNA甲基化变化进行高通量、非放射性测定的方法。
该试剂盒包含检测甲基化DNA相对水平的全部试剂。最高200 ng的纯化DNA会结合到检测条的孔中。甲基化DNA是通过使用捕获和检测抗体而被检测到的,并随后通过比色法进行定量。存在于样品中的甲基化DNA量与测量得到的吸光值成正比。
提供一组甲基化DNA对照。可绘制标准曲线(范围:10-100 ng)或使用单一量的DNA作为阳性对照。由于总体甲基化水平可能因组织、正常或疾病状态而异,因此建议对不同DNA浓度的样本设置重复以确保生成的信号落在所使用酶标仪的检测范围内。
该试剂盒可允许客户测定两个不同DNA样品的相对甲基化状态。
试剂盒组件 |
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1 x 洗涤缓冲液
对于48次反应的试剂盒,将11 mL 10x 洗涤缓冲液加入至99 mL分子生物学级的水中。在室温下可保存长达六个月。
对于96次反应的试剂盒,将22 mL 10x 洗涤缓冲液加入至198 mL分子生物学级的水中。在室温下可保存长达六个月。
DNA稀释液
将样品或对照DNA在DNA结合液中进行稀释。每孔可最结合最高200 ng的总DNA。
DNA结合
甲基化DNA捕获
检测方法
在计算相对于甲基化对照DNA的甲基化水平时,可采用以下步骤。
单点法
相对于甲基化对照DNA的甲基化百分比
标准曲线法
来自甲基化对照DNA标准曲线的样品中甲基化DNA ng数
故障排除 |
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