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油酸在细胞培养中的应用

油酸在无血清真核细胞培养中的重要性和应用,包括杂交瘤细胞和中国仓鼠卵巢(CHO)细胞培养

油酸是一种无血清培养基补充剂,可用于生物制造、组织工程及各种特殊培养基:

n-3、n-6和n-9家族的脂肪酸是细胞培养系统的重要补充剂。在用于生物制造异源蛋白质(例如单克隆抗体)的细胞培养系统中,这类成分非常重要。脂肪酸经证对中国仓鼠卵巢(CHO)细胞的生长和生产力很重要。

在动物细胞中,油酸(18:1,n-9)通过硬脂酸脱氢产生。油酸进一步延伸并去饱和,形成n-9家族脂肪酸。以往,油酸及其前体作为血清、白蛋白成分或酯化为胆固醇等分子,加入培养细胞。油酸在水溶性培养基中溶解性差,且容易发生过氧化。无血清、无动物蛋白和无蛋白质培养基制剂的出现,增加了油酸递送至培养细胞的难度。

在开发用于生物制造和组织工程的专有培养基时,找到可作为稳定补充剂的油酸制剂是一大挑战。 

油酸在细胞培养系统中的主要功能:

  • 长期能量储存:来自NADPH和ATP的能量储存在脂肪酸中。脂肪酸与甘油主链酯化,形成一组名为甘油单酯、甘油二酯和甘油三酯(中性脂肪)的化合物。脂肪酸降解时会释放能量。
  • 脂肪酸是其他分子的前体:前列腺素、前列环素、血栓素、磷脂、糖脂和维生素。
  • 结构元件:脂肪酸是细胞膜等细胞结构的重要组成部分。

油酸的化学特性使其成为一种有用的无血清培养基补充剂:

脂肪酸(FA)属于不溶于水的长链羧酸。这类脂肪酸链的长度可为 4 至 30 个碳原子,但生理上最重要的脂肪酸的长度可达16至22个碳原子。由于脂肪酸是通过添加乙酰基自然合成的,因此它们具有偶数个碳原子-C2、C4等,可为饱和或不饱和状态。天然脂肪酸的双键呈顺式构型,通常与甘油主链酯化形成复杂的脂质。含有多个双键的脂肪酸称为称为多元不饱和脂肪酸(PUFA)。

在动物中,大多数具有16 个以上碳原子的脂肪酸属于三大脂肪酸家族之一。同一家族中的所有不饱和脂肪酸均为n-3、n-6或n-9。这些FA家族的成员不可相互转换。棕榈酸家族; 棕榈酸为饱和酸,但由其衍生的不饱和脂肪酸是n-9型。动物细胞可以从头合成棕榈脂肪酸及其n-9衍生物。然而,从头合成需要利用能量。棕榈酸 (16:0) 是硬脂酸 (18:0) 的前体。棕榈酸也可脱氢形成棕榈油酸(16:1,n-9)。许多其他重要的脂肪酸均源自棕榈油酸。在动物细胞中,油酸(18:1,n-9)通过硬脂酸脱氢(去饱和)产生。油酸进一步延伸并去饱和,形成n-9家族脂肪酸。如果没有足量的油酸,细胞就无法生成其他重要的脂肪酸和脂肪酸衍生物。

可在无血清培养中增强杂交瘤、中国仓鼠卵巢(CHO)和其他哺乳动物真核细胞生长的油酸产物。
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