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杜氏改良老鹰培养基 F12(DMEM F12)

四瓶含有橙色液体的 DMEM F12 培养基。

近年来,研究人员报道了用无血清培养基培养多种细胞系的方法,这种培养基含有营养物质、生长因子和激素,以替代血清。Mather 和 Sato(BBRC,1985 年)报道了在无血清培养基中成功培养出 Leydig 和 Sertoli 细胞的事例,无血清培养基中含有胰岛素、转铁蛋白、表皮生长因子、促卵泡生成素或促卵泡激素、somatomedin 和生长激素。 

虽然激素及其浓度对研究中的细胞类型有特定要求,但这些研究发现的最佳培养基是杜氏改良老鹰培养基(DMEM)和汉姆F-12营养混合物的1:1混合物。这种被称为DMEM/F12培养基的混合物含有21种氨基酸、10种维生素、葡萄糖、铁和锌等成分。配方中还可加入最终浓度为 15 mM 的 HEPES 缓冲液,以弥补因去除血清而损失的缓冲能力。这种合成培养基不含任何血清、蛋白质、脂类或生长因子,因此可能需要补充 胎牛血清 (FBS),视细胞培养类型而定。某些商业配方可能包含或不包含谷氨酰胺或酚红。


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DMEM/F12 应用

高级基础培养基 DMEM/F12 通常用于需要低血清或无血清培养基的应用中,如三维类器官培养或干细胞培养。DMEM/F12 培养基还可用于帮助优化需要低血清或无血清条件的细胞转染。

除了通常需要低血清或无血清环境的干细胞培养外,原代细胞也可在 DMEM/F12 培养基中培养。这包括成纤维细胞、MDCK细胞、神经细胞系、神经胶质细胞和平滑肌细胞,它们的生长和功能与补充高浓度血清的原代细胞相当或更胜一筹。用 DMEM/F12 培养基培养的细胞也显示出与高血清条件下培养的细胞相同的细胞形态。



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