细胞生长和维持

细胞生长阶段

确保细胞充分生长对于从细胞培养研究中收集准确数据至关重要。

细胞在培养过程中的生长一般分为四个阶段：

1. 滞后期 - 细胞正在适应培养条件，不会分裂。
2. 对数（对数）生长阶段 - 细胞正在积极分裂，因此这是评估群体生长或收集数据的最佳阶段。
3. 高原（静止）期 - 细胞接近 100%汇合时，生长速度减慢，细胞废物积累，资源耗尽，细胞最容易受到应激或损伤。
4. 衰退期 -随着细胞死亡占主导地位，活细胞数量减少。

细胞培养基、补充剂和试剂

培养细胞的生长需要营养供应。哺乳动物细胞培养基除了提供均衡的盐类、碳水化合物、氨基酸、维生素、脂肪酸和脂类、蛋白质和肽、微量元素和生长因子外，还必须保持生理pH值。胎牛血清（FBS）是哺乳动物细胞培养中使用最广泛的生长补充剂，因为它含有许多这些必要的细胞营养物质，并已被证明可支持培养细胞和组织的生长。

由于培养基和补充剂通常为机会微生物的生长提供丰富的营养，因此成功的细胞培养需要无菌技术和定期观察，以确保不含可能导致细胞死亡或影响活体生长的污染物。对于显微镜下无法观察到的常见微生物污染物，使用支原体检测试剂进行常规筛查可保护培养物和组织繁殖环境。P.pastoris （Pichia），常用于重组蛋白表达和基因功能研究。酵母培养基配方中的关键营养物质通常包括蛋白胨、酵母提取物、葡萄糖或葡萄糖。

细胞传代技巧和窍门

酵母培养基配方中的关键营养物质通常包括蛋白胨、酵母提取物、葡萄糖或葡萄糖。

细胞培养环境和培养器皿

培养细胞使用一次性无菌塑料器皿进行培养和处理，包括组织培养瓶和多孔板、血清学移液管、无菌瓶口过滤器和无菌注射器过滤器。塑料组织培养瓶和培养皿通常经过处理，以提供亲水性表面，便于粘附细胞附着。

培养细胞必须保持在能再现其来源生物体内这些参数的温度和气体环境中。装有细胞和培养基的培养皿通常保存在可精确控制温度和混合气体的培养设备中。然而，采用微流控技术的小型台式培养系统可为预测性体外模型提供最真实的环境。