热原检测_单核细胞活化试验-默克生命科学

单核细胞活化试验（MAT）

MAT用于检测注射剂（如药品和生物制剂）中的内毒素和非内毒素致热原，根据监管指南，该方法为传统的动物试验提供了一种体外替代方案。

兔热原试验和鲎血细胞裂解物（LAL）试验是广泛用于热原检测的方法。这两种方法均使用动物，且存在某些局限性。兔热原试验的可靠性较差，因为动物的反应可能与人类的反应存在显著差异。而在LAL试验中，仅能检测内毒素，这会忽略受试样品中可能存在的非内毒素热原，从而造成安全风险。

为克服这些局限性，单核细胞活化试验（MAT）于2010年被纳入《欧洲药典》作为替代兔源热原试验的药典方法（EP第2.6.30章），并在美国食品药品监督管理局（FDA）的行业指南中有所提及。

请注意：《欧洲药典》委员会根据“3R原则”（替代、减少、优化），考虑到单核细胞活化试验（MAT）是最佳替代方案，决定终止兔热原试验。自2025年7月起，欧洲将禁止进行兔热原试验（RPT），且关于兔热原试验的总则2.6.8章已被删除。

• 符合国际法规和指南：顺应业界及监管机构减少动物实验使用的伦理趋势。
• 反应性标准化且灵敏度高（0.05 EU/mL）。即用型细胞系的便捷性减少了繁琐的实验室工作，并避免了对细胞培养实验室的需求。
• 合格细胞：Mono-Mac-6 细胞不仅被引用在 MAT 的国际验证中，还被认定为能够表达所有表面 Toll 样受体 (TLRs)，以确保检测到广泛范围的致热原。

非内毒素致热原阳性对照

《欧洲药典》第2.6.30章（单核细胞活化试验）规定：“预备试验应包括使用至少2种Toll样受体的非内毒素配体（例如肽聚糖、脂茶碱酸、合成细菌脂蛋白、鞭毛蛋白和粗制细菌全细胞提取物）对试验体系进行验证， 其中至少1种应添加到待测制剂中。所选用的非内毒素致热原应反映待测制剂中最可能存在的污染物。

为满足此要求，我们提供了一系列扩展的阳性对照：

• 涵盖制药生产过程中通常发现的多种污染物（革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌、病毒和支原体）。
• 针对多种单核细胞Toll样受体（TLR）

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