如何使用 mPAGE® Lux 凝胶浇铸系统更快地制备 SDS-PAGE 凝胶

了解 mPAGE® Lux 浇铸系统，只需 3 分钟即可制备即用型 SDS-PAGE 凝胶。新鲜的 SDS-PAGE 凝胶，随时待命，随用随取。感兴趣吗？请在下方索取资料。

轻松制作电泳胶

如何制备SDS-PAGE凝胶？凝胶制备通常需要分步骤浇注分离胶和堆积胶，这一过程既耗时又繁琐。传统上，研究人员在满足凝胶制备和电泳需求方面可选方案有限。 我们创新的 mPAGE® Lux SDS-PAGE 凝胶浇铸系统旨在兼具手工浇铸凝胶的灵活性与预制凝胶的可靠性，同时避免了其他替代方案带来的质量损失、时间浪费或显著更高的成本。使用我们的 mPAGE® Lux 浇铸系统，三分钟内即可完成凝胶制备。您可以告别传统方法及其耗时且繁琐的手工操作步骤。这真是令人耳目一新。

mPAGE® Lux 凝胶浇铸系统特点与优势

mPAGE® Lux 凝胶浇铸系统采用更快速、更简便、更安全的方法替代传统的蛋白质凝胶浇铸流程，并能获得更可重复的结果。使用 mPAGE® Lux 浇铸系统，90 秒即可固化一块微型凝胶，而传统方法则需要超过 90 分钟。 我们采用紫外线照射的快速浇铸工作流程可加速 mPAGE® Lux Bis-Tris 试剂的固化，而 Bis-Tris 凝胶化学特性则使电泳时间比传统方法更短。请观看下方视频，了解如何使用该浇铸系统制作蛋白质凝胶。

采用精确系统控制的一步法光聚合技术，加上准备步骤更少，意味着出错的可能性更低。我们的 mPAGE® 浇铸器可防止渗漏，而使用 Bis-Tris 凝胶与手工浇铸的 Tris-甘氨酸凝胶相比，能提供更优异的条带质量。 此外，mPAGE® Lux 试剂盒、mPAGE® TurboMix 试剂盒和 mPAGE® 预制胶均采用 Bis-Tris 化学体系，并使用相同的电泳缓冲液和凝胶染色剂。我们的 mPAGE® Lux 浇铸系统不使用 APS 或 TEMED，通过减少有毒化学品的使用，提供更安全的选择。

为了进一步提高兼容性并满足您的工作流程需求，我们现推出 mPAGE® 夹扣式遮罩。使用 mPAGE® 夹扣式遮罩时，在通过固化系统（mPAGE® Lux 固化站）对凝胶进行固化时，可同时使用 Bio-Rad Mini-PROTEAN® 短板、间隔板和梳子，以及 mPAGE® Mini 短板、间隔板和梳子。

注：使用夹扣式遮罩时，不再需要 mPAGE® Lux 遮罩短板，但遮罩短板仍可继续使用。

传统手工浇铸工作流程

凝胶浇铸的步骤有哪些？

SDS-PAGE凝胶的制备通常包括称量、预混合凝胶溶液、浇铸以及等待聚合完成。虽然传统的手工浇铸凝胶方法常被视为更经济的解决方案，但该方法耗时较长，需要许多人工操作步骤，这可能会导致凝胶配方不一致。手工浇铸凝胶的质量及其所生成的数据质量，取决于蛋白质凝胶配方的一致性，这样才能避免因凝胶失败而浪费宝贵的试剂和时间。

mPAGE® Lux 浇铸系统为您的凝胶浇铸流程提供了创新解决方案。您不再需要在节省时间和节省资源之间做出取舍。我们这款新型凝胶浇铸系统让研究人员能够在需要时快速、轻松地浇铸凝胶，其成本仅为预制凝胶技术的零头。借助 mPAGE® Lux 浇铸系统，提升您的实验室效率，并优化凝胶电泳工作流程。

mPAGE® Lux 浇铸系统和 Bis-Tris 试剂盒

将 mPAGE® Lux 浇铸系统引入您的实验室，3 分钟内即可获得即用型 Western blot 凝胶和电泳凝胶。放松一下，体验快速、低浪费且无需担心失败的凝胶浇铸过程。这才是新鲜体验。 充分利用我们的 mPAGE® Lux 浇铸系统套件，其中包含 mPAGE® Lux 固化站、mPAGE® Lux 混合管、mPAGE® 凝胶浇铸器、10 孔和 15 孔 mPAGE® 梳子、mPAGE® 迷你间隔板以及 10 孔和 15 孔 mPAGE® Lux 遮罩短板。以下是各浇铸套件的描述和配置：

 mPAGE® Lux SDS-PAGE 凝胶浇铸操作规程

所有溶液必须避光保存，以防止聚合。在浇铸凝胶前，请将所有溶液调至室温。

分离凝胶

1. 将分离液与稀释液混合，制备分离凝胶溶液。混合体积请参见下表。分离凝胶溶液可批量制备，以便依次制备多个凝胶。
2. 使用干净的移液管，将分离液加入黑色混合管或其他不透明容器中。
3. 使用干净的移液管，将稀释剂加入同一混合管中。
4. 通过轻轻将容器首尾翻转来混合。切勿使用涡旋混合器。

电泳胶溶液体积

使用以下体积可制备一块 1.0 mm 的凝胶。有关 0.75 mm 和 1.5 mm 溶液体积的信息，请参阅产品页面上的完整用户指南。

上样凝胶

上样液开瓶即用。制作1.0 mm凝胶时，需使用1.5 mL上样液。重要提示：请勿稀释上样液。

凝胶浇铸

1. 用温和的洗涤剂清洗玻璃板，并用去离子水冲洗。使用前用70%乙醇擦拭。
2. 使用 mPAGE® 间隔板和 mPAGE® Lux 带遮罩短板组装 mPAGE® 凝胶浇铸器，以形成玻璃卡匣。带遮罩短板应放置在卡匣左侧，使文字朝向左侧。在关闭浇铸器夹具之前，请确保两块玻璃板在浇铸器底座处对齐。注意：mPAGE® Lux 带遮罩短板必须与 mPAGE® 固化站配合使用。
3. 按下电源按钮，开启 mPAGE® Lux 固化站。固化站将启动自检。自检完成后，将显示就绪屏幕。
4. 打开门，将凝胶浇铸框放入固化站，使浇铸框对齐在缓冲块后方。
5. 使用干净的 5 毫升移液管，将配好的分离凝胶溶液加入 mPAGE® 凝胶浇铸框中，液面高度应达到标示的填充线。
6. 使用干净的 5 毫升移液管，缓慢加入堆积溶液，直至液面达到短板顶部。
7. 以一定角度缓慢插入 mPAGE® 梳子，以防止梳齿下方形成气泡。重要提示：混合使用不同格孔规格可能会导致格孔形成不规范。请使用：
   • 10孔梳搭配10孔 mPAGE® Lux 遮蔽短板
   • 15孔梳搭配15孔 mPAGE® Lux 遮蔽短板
8. 擦去短板前端溢出的溶液，以防止溢出处出现固化不完全的情况。
9. 将夹扣式遮罩安装在短板和浇铸框架上。
   • 遮罩的前端应紧贴短板，完全覆盖梳齿。
10. 关闭固化站门，并选择凝胶厚度。
11. 按“开始”键开始凝胶固化。提示：如果要浇铸多个凝胶，可以在第一个凝胶固化时，立即使用第二台凝胶浇铸机开始凝胶浇铸过程。
12. 固化完成后，打开门并取出凝胶铸造机。通过降低张力夹以释放铸造机框架，将卡匣从凝胶铸造机中取出。然后打开框架两侧，从顶部将卡匣滑出。
13. 请立即使用凝胶，或用湿纸巾包裹卡匣，平放于拉链袋或其他密封容器中，在 2-8 °C 条件下保存，最长不超过 2 周。请勿将卡匣暴露在空气中，否则凝胶会变干。

mPAGE® Lux Bis-Tris 凝胶（含 MOPS 和 MES 电泳缓冲液）

mPAGE® Lux Bis-Tris 凝胶专为配合 MOPS 或 MES 电泳缓冲液使用而设计。根据所使用的电泳缓冲液不同，可获得截然不同的分离图谱。MOPS 缓冲液可用于精细调节大分子和中型蛋白的分离，而 MES 缓冲液则能为小分子蛋白提供最佳分离效果。 请参考迁移图（图 8），以确定哪种凝胶电泳缓冲液系统最适合您预期的分离范围。

电泳后如何取出凝胶

使用凝胶刮刀将凝胶从玻璃托盘中取出。沿凝胶边缘（右侧）切割，以避免凝胶撕裂。mPAGE® Lux Bis-Tris 凝胶仅应与 MOPS-SDS 或 MES-SDS 电泳缓冲液配合使用。Bis-Tris 凝胶与 Tris-甘氨酸电泳缓冲液不兼容。

使用 mPAGE® Lux 凝胶浇注系统实现可持续凝胶浇注

为了量化我们的 mPAGE® Lux 浇铸系统带来的可持续性影响，我们将其与一种代表性的快速浇铸试剂盒（用于手工浇铸蛋白质电泳用聚丙烯酰胺凝胶）进行了对比计算。这两种系统均需要使用可重复使用的浇铸套件和手工浇铸试剂套件。 mPAGE® Lux 浇铸系统还需使用 mPAGE® Lux 凝胶固化站，而基准系统则需使用 APS 和 TEMED，这两者需与手动浇铸试剂盒分开购买。

本次评估考虑了在 mPAGE® Lux 凝胶固化站最低使用寿命（5 年）内，制备电泳凝胶所需的所有组件。这包括手工浇铸套件、必要试剂以及所有所需消耗性实验室器具在生产、包装、分销、使用及报废阶段产生的影响。 计算基于每年生产 250、500 或 1000 块凝胶的假设，并宣称其与基准系统相比具有最小差异。

材料与产品的可持续性属性

尽管 mPAGE® Lux 浇铸系统是用于手工浇铸聚丙烯酰胺凝胶的创新工作流程解决方案，但仍需使用一定量的塑料耗材和危险试剂。虽然在此应用中尚无丙烯酰胺的合适替代品，但该系统已消除了所有其余的化学危害，且所需塑料耗材的用量较基准系统显著减少。

如图所示，mPAGE® Lux 浇铸系统所需的凝胶固化站额外质量，已被凝胶浇铸工作流程中所需产品用量的减少所抵消。在仪器整个使用寿命期间，与快速浇铸系统相比，系统总质量减少了至少 20%。

每年浇铸500块凝胶时的系统终身质量（kg）：

此外，该产品遵循SMASH包装原则——这是我们的战略，旨在通过减少包装、采用更可持续的材料以及简化回收流程，推动包装可持续性的提升。

• 与基准系统相比，产品及其功能单元所需的附加物品的包装量减少了30%。
• 系统中 100% 的纤维基包装均通过了可持续林业认证。
• 所有保护性泡沫衬垫均由 100% 再生聚乙烯制成。
• 根据我们的 SMASH 准则，包装中不含任何会阻碍回收利用的材料。

mPAGE® Lux 浇铸系统的分销与产品使用

所需耗材的减少以及某些试剂的取消，显著降低了与运输相关的影响。在仪器最低使用寿命期间，常规运输组件及其相关包装的质量减少了至少24%。

虽然新增的设备在运行过程中确实需要消耗能源，但 mPAGE® Lux 浇铸工作站的设计充分考虑了节能需求。通过采用 LED 照明和简洁直观的用户界面，其总体能耗始终保持在极低的水平。 固化 1000 块凝胶所需的累计能耗仅为 1.65 千瓦时，相当于笔记本电脑约 33 小时的用电量。整个凝胶浇注工作流程中产生的一次性塑料废弃物减少了至少 25%。此外，mPAGE® Lux 试剂在环境光照下会自发聚合，从而消除了废物流中未聚合的丙烯酰胺残留物。

通过按需浇铸新鲜、即用型凝胶，消除了预先制备后可能闲置的凝胶带来的风险。mPAGE® Lux 系统无需囤积试剂盒或预先浇铸不同浓度的凝胶，从而减少了因组分过期而产生的废弃物。mPAGE® Lux 固化站属于电子设备，因此必须按照所有适用法规进行处置。 有关电子废物处置的更多信息，请访问我们的《WEEE 合规》页面。

该产品在整个产品生命周期内均展现出较基准系统显著的改进，已被认定为“更环保的替代产品”。如需了解更多信息，请访问我们关于“可持续设计框架”及“更环保的替代产品”的页面。

使用 mPAGE® Lux 系统无需染色即可快速可视化凝胶内蛋白质检测

SDS-PAGE 是一种常用于按大小分离蛋白质和其他生物分子的技术。凝胶中的蛋白质可通过成熟的比色或荧光染色剂进行检测，例如考马斯亮蓝（CBB）、银染和 SYPRO™ Ruby。这些染色方法的灵敏度各不相同，且通常需要多个耗时的孵育步骤。

三氯乙醇（TCE）最初被描述为一种荧光淬灭剂，它是一种在紫外光激活后产生新荧光团的化合物，可将色氨酸的荧光从其天然发射波长（~350 nm）向可见光波段（~512 nm）偏移。^1-3 Kazmin等人利用TCE及其他三氯化合物的这一特性，开发了一种快速且灵敏的一步法凝胶染色方案。⁴ 随后，研究人员在凝胶制备过程中将TCE直接掺入SDS-PAGE凝胶中，从而无需繁琐的染色步骤即可检测蛋白质。^5,6 本文将介绍如何制备含TCE的mPAGE® Lux凝胶，以实现无需染色的凝胶内蛋白质检测。

染色法与免染色法的比较

对 TCE 可视化法与考马斯明凝胶染色法进行了比较。两种方法的检测灵敏度相当（图 10）。然而，基于 TCE 的检测无需染色步骤，可节省至少两小时至数小时的制备时间，具体时长取决于您当前采用的染色方法。

方法兼容性

还对该方法与下游分析（本例中为Western blot）的兼容性进行了测试。图11展示了采用TCE与未采用TCE制备的Western blot结果对比。如图所示，当Western blot凝胶活化45秒并在转印前成像时，可观察到相似的免疫检测灵敏度。

然而，由于mPAGE® Lux凝胶聚合的特性，较长的活化时间和曝光时间可能会改变蛋白质转移效率。因此，可能需要对蛋白质转移过程进行优化。如果计划在TCE显色后进行Western blotting，建议将活化时间控制在最短，因为活化过程会影响mPAGE® Lux凝胶的蛋白质转移效率。

采用三氯乙烷（TCE）活化的无染色技术

由于这种 TCE 活化方法无需额外的染色步骤，因此既节省时间，又可在电泳结束后立即进行。本研究结果还表明，其蛋白质检测的灵敏度与采用染色的其他传统方法相当。

总体而言，使用 mPAGE® Lux 凝胶及其他 mPAGE® 电泳产品，您可以快速且可重复地制备和运行凝胶。 此外，mPAGE® Lux 凝胶与本文所述的基于 TCE 的无染色技术兼容，因此可进一步简化您当前实验方案中的操作步骤。这为研究人员提供了一种宝贵的工具：既能继续依托 mPAGE® Lux 浇铸技术的便捷性和灵活性，又能获得快速蛋白质可视化的额外优势。

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