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主页凝胶电泳用于 SDS-PAGE 凝胶的 mPAGE® Lux 铸模系统

用于 SDS-PAGE 凝胶的 mPAGE® Lux 铸模系统

了解mPAGE® Lux凝胶浇铸系统，3分钟内即可完成SDS-PAGE凝胶浇铸。 If you have questions and would like to learn more on how to cast faster, click here to fill out a form 我们的团队将与您联系。

mPAGE® Lux SDS-PAGE 凝胶浇注系统

如何浇注 SDS-PAGE 凝胶？凝胶浇铸通常需要在一个耗时的步骤中浇铸分辨凝胶和堆叠凝胶。传统上，研究人员很少有满足凝胶浇注和电泳需求的选择。我们的创新型 mPAGE® Lux SDS-PAGE 凝胶浇注系统旨在提供手工浇注凝胶的灵活性和预浇注凝胶的可靠性，而不会损失质量、时间或因其他选择而大幅提高成本。使用我们的 mPAGE® Lux 浇注系统，凝胶在三分钟内即可完成。您可以告别传统的凝胶制作方法及其耗时的手动步骤。这是新鲜的。

部分概述

申请演示

mPAGE® Lux

mPAGE® Lux浇铸系统以更快、更简单、更安全的方法取代了凝胶浇铸过程，并获得了更高的可重复性。使用 mPAGE® Lux 浇注系统只需 90 秒钟就能完成微型凝胶的固化，而传统方法则需要 90 分钟以上。我们的快速浇铸工作流程采用紫外线照射，加快了 mPAGE® Lux Bis-Tris 试剂的固化速度，同时与传统方法相比，Bis-Tris 凝胶化学反应可缩短运行时间。

使用精确的系统控制和较少的制备步骤进行一步光聚合意味着出错的机会更少。我们的 mPAGE® Caster 可防止泄漏，与手工浇铸的 Tris-Glycine 凝胶相比，使用 Bis-Tris 凝胶可提供更优越的条带质量。此外，mPAGE® Lux 试剂盒、mPAGE® TurboMix 试剂盒和 mPAGE® 预制凝胶均使用 Bis-Tris 化学物质，并共享相同的运行缓冲液和凝胶染色剂。我们的 mPAGE® Lux 铸造系统不使用 APS 或 TEMED，使用更少的有毒化学物质，提供更安全的选择。

为了进一步提高兼容性和满足您的工作流程需求，我们现在提供 mPAGE® Clip-on Mask。有了 mPAGE® Clip-on 面罩，Bio-Rad 的 Mini-PROTEAN® 短板、隔板和梳子以及 mPAGE® Clip-on 面罩都能与 mPAGE® 短板、隔板和梳子以及 mPAGE® Clip-on 面罩兼容。sup>® Mini 短板、隔板和梳子可在使用 mPAGE® Lux 固化站固化凝胶时使用。

注意：使用夹式掩膜时不再需要 mPAGE® Lux 掩膜短板，但仍可使用掩膜短板。

用于 SDS-PAGE 凝胶的传统手工浇注工作流程信息图，显示扩展步骤和 90 分钟或更长的聚合时间

图 1.用于 SDS-PAGE 凝胶的传统手工浇注工作流程信息图，显示了延长的步骤和 90 分钟或更长的聚合时间。

mPAGE®Lux 工作流程

mPAGE® Lux 铸型系统的双鸢尾凝胶铸型工作流程，步骤更少，聚合时间不到 3 分钟。

图 2.传统凝胶铸造与 mPAGE® Lux 工作流程的对比。与传统凝胶浇注技术相比，mPAGE® Lux 浇注系统的整体步骤更少，聚合时间更短，而且不会产生有毒废物。由 mPAGE® Lux 铸型系统创建的凝胶与 mPAGE® Mini-gel Tank 和 Bio-Rad Mini-PROTEAN Cells 兼容。使用我们的 mPAGE® 缓冲液可获得出色的分辨率并缩短运行时间。Lux 凝胶与 Bis-Tris 兼容缓冲液和染色试剂兼容。

凝胶浇铸的步骤有哪些？

浇铸 SDS-PAGE 凝胶通常包括称重、预混凝胶溶液、浇铸和聚合等待时间。传统的手工浇注凝胶方法虽然经常被认为是更经济的解决方案，但却耗费时间，需要许多手工步骤，可能导致凝胶配方不一致。手糊凝胶的质量及其可能帮助生成的数据依赖于配方的一致性，这样才能避免因凝胶失败而浪费宝贵的试剂和时间。

用于 mPAGE® Lux 浇注系统的双三聚氰胺和三甘氨酸凝胶数据比较

图 3.mPAGE® Lux Bis-Tris 凝胶与手糊三甘氨酸凝胶的数据质量比较。mPAGE® Lux Bis-Tris 凝胶（左）与手铸三甘氨酸凝胶（右）的条带质量比较。两种凝胶的丙烯酰胺含量均为 10%，装载的是 A431 人细胞裂解物滴定液。在 200V 电压下电泳时间为 42 分钟（力士凝胶），在 120V 电压下电泳时间为 119 分钟（三甘氨酸凝胶）。凝胶用 ReadyBlue™ Coomassie 凝胶染色剂染色。

mPAGE® Lux 浇注系统为您的凝胶浇注过程提供了创新的解决方案。您不必再选择节省时间或资源。我们新颖的凝胶浇注系统可让研究人员在需要时快速轻松地浇注凝胶，而成本仅为预制凝胶技术的一小部分。使用 mPAGE® Lux 浇注系统提高您的实验室效率，升级您的凝胶电泳工作流程。

用于 mPAGE® Lux 铸型系统的 Western 印迹转移方法。

图 4.用于湿法、快速法和半干法转移的 Western 印迹比较。使用 12% mPAGE® Lux Bis-Tris 凝胶进行比较，凝胶是用 A431 人细胞裂解物滴定的，并用不同的转移方法转移到 Immobilon®-P 膜上。用抗 EGFR 和抗 ErK1/2 抗体在膜上印迹，然后用 Immobilon® ECL Ultra Western HRP 底物检测。Turbo 法 = 使用 Bio-Rad Trans-Blot® Turbo™ 转印系统和 Trans-Blot® Turbo™ 转印包进行转印。

在相同条件下分析 A431 裂解物时，四种 mPAGE® Lux 凝胶显示出一致的性能。
mPAGE® Lux Casting 系统的重现性是通过计算四条 Bis-Tris 凝胶蛋白质条带的未染色分子量标记物相对迁移距离的标准偏差来体现的。

图 5。 mPAGE® Lux Bis-Tris 凝胶的再现性。B. 计算每个凝胶中未染色分子量标记物的相对迁移距离（Rf）。每个蛋白质条带的标准偏差如图所示。

mPAGE® Lux 试剂保质期评估表明，其稳定性可达 12 个月。

图 6.mPAGE® Lux Bis-Tris 试剂保质期分析。使用 (A) 0 个月、(B) 6 个月或 (C) 12 个月或 (D) 24 个月的试剂浇铸的 mPAGE® Lux Bis-Tris 凝胶。在运行模式或运行时间方面没有观察到差异。

mPAGE® Lux 铸型系统和 Bis-Tris 试剂盒

将 mPAGE® Lux 铸型系统添加到您的实验室，在 3 分钟内即可获得即用凝胶。深吸一口气，习惯快速凝胶浇铸过程，减少浪费，无需担心失败。这是新鲜的。我们的 mPAGE® Lux 浇注系统套件包括 mPAGE® Lux 固化站、mPAGE® Lux 混合管、mPAGE®mPAGE® 10 孔和 15 孔梳子，mPAGE® Mini 隔板，mPAGE® Lux 10 孔和 15 孔屏蔽短板。对于 0.75 mm 厚的 mPAGE® Lux 浇注系统，不包括 15 孔梳子和屏蔽短板。

mPAGE® Lux 凝胶浇铸站

图 7.mPAGE® Lux 固化站。

mPAGE® Lux双ris试剂盒是mPAGE® Lux铸造系统的专用试剂盒。mPAGE® Lux Bis-Tris 试剂盒由 3 种成分组成：溶解液、稀释液和堆积液。该试剂盒支持 8.0-13.5% 之间的各种丙烯酰胺凝胶。mPAGE® Lux 试剂盒的说明和配置如下：

 mPAGE® Lux SDS-PAGE 凝胶浇铸规程

所有溶液必须避免阳光照射，以防聚合。

溶解凝胶

  1. 混合溶解液和稀释液配制溶解凝胶。混合体积见下表。
  2. 使用干净的移液管，将溶解液加入黑色混合管或其他不透明容器中。
  3. 使用干净的移液管，将稀释液加入同一混合管中。

溶解凝胶溶液体积

使用以下体积制作单个 1.0 mm 凝胶。关于 0.75 mm 和 1.5 mm 溶液量，请参阅 SigmaAldrich.com 产品页面上的完整用户指南。

堆叠凝胶

堆叠溶液可直接从瓶子中取出使用。1.0 mm 的凝胶使用 1.5 mL 堆积液。重要：

凝胶浇铸

  1. 用中性洗涤剂清洁玻璃板，然后用去离子水冲洗。
  2. 使用 mPAGE® Spacer Plate 和 mPAGE® Lux Masked Short Plate 组装 mPAGE® Gel Caster，形成玻璃盒。屏蔽短板的方向应与玻璃盒左侧的文字一致。在关闭脚轮夹之前，确保两块玻璃板在脚轮框架底部对齐。注意：mPAGE® Lux 遮光短板必须与 mPAGE® 固化站一起使用。
  3. 按下电源按钮，打开 mPAGE® Lux 固化站。固化站将启动自检。
  4. 打开门，将凝胶脚轮放入固化站，对准保险杠后面的脚轮。
  5. 使用干净的 5 mL 移液管，将准备好的溶解凝胶溶液加入 mPAGE® 凝胶脚轮框架上的指定填充线。
  6. 使用干净的 5 mL 移液管，缓慢加入堆叠溶液至短板顶部。
  7. 以一定角度缓慢插入 mPAGE® 梳齿，以防止齿下形成气泡。重要：混合不同的孔型可能导致孔型不正确。使用：
    • 10 孔梳子与 10 孔 mPAGE® Lux 遮光短板配合使用
    • 15 孔梳子与 15 孔 mPAGE®
  8. 擦拭短板前面溢出的溶液，防止溢出的溶液固化不完全。
  9. 将夹式面罩安装在短板和浇铸框上。
    • 面罩前端应紧贴短板，完全覆盖梳齿。
  10. 关闭固化站门，选择凝胶厚度。提示：如果要浇注多个凝胶，可在第一个凝胶固化时，用第二个凝胶浇注器开始凝胶浇注过程。
  11. 固化完成后，打开门，取下凝胶浇注器。放下张力夹，松开脚轮框架，从凝胶脚轮上取下供片盒。
  12. 立即使用凝胶，或用湿纸巾包裹凝胶盒，平放于拉链袋或其他密闭容器中，在2-8 °C下保存2周。请勿将凝胶盒拆开放置，否则凝胶会变干。

mPAGE® Lux 使用 MOPS 和 MES 运行缓冲液的双鸢尾凝胶

mPAGE® Lux 双鸢尾凝胶专为使用 MOPS 或 MES 运行缓冲液而设计。根据所使用的运行缓冲液，可实现非常独特的分离模式。MOPS 缓冲液可用于微调大、中型蛋白质的分离，而 MES 缓冲液则可实现较小蛋白质的最佳分离。请参考迁移图（图 8），确定哪种凝胶运行缓冲液系统最适合预期的分离范围。

使用 MOPS 和 MES 运行缓冲液的 mPAGE™ Lux 双蝶形凝胶化学迁移图（kDa）。图表显示了 8%、10%、12% 和 13.5% mPAGE™ Lux 凝胶中蛋白质的迁移情况。使用 MOPS 运行缓冲液分离的蛋白质通常比使用 MES 运行缓冲液分离的蛋白质迁移得更远。较低的凝胶百分比用于较高分子范围的更好分离，而较高的凝胶百分比用于较低分子范围的分离。 MOPS 运行缓冲液适用于中高分子量蛋白质的分离，而 MES 运行缓冲液则具有分离中低分子量蛋白质的优势。

图 8.使用 MOPS SDS 运行缓冲液和 MES SDS 运行缓冲液的 mPAGE® Lux 双鸢尾凝胶的迁移图（kDa）。

电泳后如何取出凝胶

使用凝胶刮刀从玻璃盒中取出凝胶。mPAGE® Lux Bis-Tris 凝胶只能与 MOPS-SDS 或 MES-SDS 运行缓冲液一起使用。Bis-Tris 凝胶与 Tris-Glycine 运行缓冲液不兼容。

使用 mPAGE进行可持续凝胶铸造。PAGE® Lux ；凝胶浇注系统

为了量化我们的 mPAGE® Lux 浇注系统对可持续发展的影响，我们计算了使用具有代表性的快速浇注套件手工浇注蛋白质电泳用聚丙烯酰胺凝胶对可持续发展的影响。这两种系统都需要使用可重复使用的浇注套件和手工浇注试剂套件。mPAGE® Lux 浇铸系统还需要使用 mPAGE® Lux 凝胶固化站，而基线系统则需要使用 APS & TEMED，它们与手工浇铸试剂盒分开出售。

本次评估考虑了在 mPAGE® Lux 固化站的最短使用寿命（5 年）内浇铸电泳凝胶所需的所有组件。这包括手铸套件、所需试剂和所有实验室消耗品的生产、包装、分销、使用和报废影响。计算假设每年生产 250、500 或 1000 个凝胶，并声称与基线系统相比差异最小。

材料和产品可持续性属性

虽然 mPAGE® Lux 浇注系统是手工浇注聚丙烯酰胺凝胶的创新工作流程解决方案，但它仍然需要使用一些塑料消耗品和危险试剂。

如图所示，mPAGE® Lux 浇注系统所需的凝胶固化站的额外重量被凝胶浇注工作流程中所需产品的减少所抵消。与快速浇注系统相比，在整个仪器使用寿命期间，系统总质量至少减少了 20%。

浇注 500 凝胶/年的使用寿命系统质量（千克）：

mPAGE® Lux 系统和参照产品系统每年浇铸 500 个凝胶所需的质量。

图 9.mPAGE® Lux 浇注系统与参考产品系统在每年浇注 500 个凝胶时系统寿命质量（千克）的比较。深蓝色 = 参考产品系统。浅蓝色 = mPAGE® Lux 浇注系统。

此外，本产品还遵循 SMASH 包装原则，我们的这一战略通过减少包装、使用更多可持续材料和更易于回收利用来推动包装的可持续发展。

  • 产品包装和功能单元所需的附加项目比基准系统减少了 30%。
  • 所有保护性泡沫插件均由 100% 可回收聚乙烯制成。

mPAGE® Lux 浇注系统的配送和产品使用

所需消耗品的减少和某些试剂的取消，大大降低了与运输相关的影响。在仪器的最短使用寿命内，定期运输的组件和相关包装的质量至少减少了 24%。

虽然新增的仪器在运行过程中需要消耗能源，但 mPAGE® Lux 铸造站在设计时充分考虑了能源效率。通过使用 LED 照明和简单直观的用户界面，整体能耗非常低。固化 1000 块凝胶所需的累计能耗仅为 1.65 千瓦时，相当于使用约 33 小时的笔记本电脑。整个凝胶浇注工作流程中产生的一次性塑料废弃物至少减少了 25%。此外，mPAGE® Lux 试剂在环境光照下会自动聚合，从而消除了废物流中未聚合的丙烯酰胺残留物。

通过根据需要浇铸新鲜的、随时可用的凝胶，消除了预先准备凝胶而导致其闲置的风险。mPAGE® Lux 系统无需储备不同比例的试剂盒或预铸凝胶，从而减少了因成分过期而产生的废物量。mPAGE® Lux 固化站属于电子设备，因此必须按照所有适用法规进行处置。有关电子废弃物处理的更多信息，请访问我们的WEEE合规性页面。

本产品在整个产品生命周期中都比基准系统有显著改进，已被指定为绿色替代产品。欲了解更多信息，请访问我们的页面，了解我们的可持续性设计框架和绿色替代产品。

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