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主页凝胶电泳mPAGE® Lux SDS-PAGE制胶系统

mPAGE® Lux SDS-PAGE制胶系统

了解可在3分钟制得SDS-PAGE即用凝胶的mPAGE® Lux制胶系统。可视需要现用现制SDS-PAGE凝胶。

mPAGE® Lux SDS-PAGE制胶系统

如何制备SDS-PAGE凝胶？凝胶通常涉及分离胶和浓缩胶的倾注步骤，是一个耗时、循规蹈矩的工艺流程。以往，能够满足研究人员制胶和电泳需求的选项少之又少。我们创新的mPAGE® Lux SDS-PAGE制胶系统兼具人工制胶的灵活性和预制凝胶的可靠性，又可保证质量和速度，同时又相对于其他选项大幅降低了成本。使用我们的mPAGE® Lux制胶系统，短短三分钟即可制成凝胶。您可自此告别传统方法及其耗时的手动制胶步骤。现用现制，立等可取。

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mPAGE® Lux制胶系统的特点和优势

相对于传统制胶工艺，mPAGE® Lux制胶系统是一种更快速、简单、安全的替代方法，可实现更具可重现性的结果。mPAGE®  Lux制胶系统可在90秒内完成小型凝胶固化，而传统方法则需要90分钟以上。我们采用紫外线照射快速制胶工作流程，加速mPAGE® Lux Bis-Tris试剂固化——Bis-Tris凝胶化学试剂相对于传统方法可缩短跑胶时间。

这种一步法光聚合工艺采用精密的系统控制，人为出错的概率更低。我们的mPAGE®制胶器可防止渗漏，选用的Bis-Tris凝胶比人工制备的Tris-Glycine凝胶条带质量更佳。此外，mPAGE® Lux试剂盒、mPAGE® TurboMix试剂盒和mPAGE®预制胶均使用Bis-Tris化学试剂，共用同一跑胶缓冲液和凝胶染色剂。我们的mPAGE® Lux制胶系统不使用APS或TEMED，有毒化学品用量更小，是一种更安全的替代方法。

传统人工制胶工作流程

传统SDS-PAGE人工制胶工作流程信息图，步骤更多、聚合时间90分钟甚至更久

mPAGE®Lux工作流程

mPAGE® Lux制胶系统的Bis-Tris制胶工作流程步骤更少，聚合时间不到3分钟。

图 1.传统制胶工作流程与mPAGE® Lux对比。相对于传统制胶技术，mPAGE® Lux制胶系统总步骤更少、聚合时间更短、有毒废弃物更少。mPAGE® Lux制胶系统制得的凝胶兼容mPAGE®小型胶槽和 Bio-Rad Mini-PROTEAN电泳槽。为实现非凡的分离度并缩短跑胶时间，请使用我们的mPAGE®缓冲液。Lux凝胶兼容Bis-Tris适用的缓冲液和染色试剂。

制胶涉及的步骤有哪些？

SDS-PAGE凝胶制备步骤通常包括称重、预混合凝胶溶液、灌注及等待聚合。尽管传统人工制胶方法往往被视为更经济的方案，但这种方法非常耗时、需要许多人工步骤，可能导致凝胶制剂不稳定。人工制胶及藉此生成的数据的质量离不开凝胶制剂的稳定性，否则就可能导致宝贵的试剂和时间因凝胶失效而白白浪费掉。

mPAGE® Lux制胶系统制得的Bis-Tris和 tris-甘氨酸凝胶数据对比

图 2.mPAGE® Lux Bis-Tris凝胶和手制tris-甘氨酸凝胶的数据质量对比。mPAGE® Lux Bis-Tris凝胶（左）和手制tris-甘氨酸凝胶（右）的条带质量对比。两种凝胶都是10%丙烯酰胺，上样A431人类细胞裂解物滴定液。电泳运行时间200V 下为 42 分钟（Lux 凝胶），120V 下为119分钟（tris-甘氨酸凝胶）。凝胶采用ReadyBlue™考马斯凝胶染色剂染色。

mPAGE® Lux制胶系统为您提供了创新的制胶工艺解决方案。您无须再在节省时间和节省资源方面作出取舍。我们全新的制胶系统让研究人员可根据需要轻松快速制备凝胶，同时成本仅相当于预制胶技术的几分之一。通过mPAGE® Lux制胶系统，可提高实验室效率并升级凝胶电泳工作流程。

mPAGE® Lux制胶系统的蛋白质转印方法。

图 3.湿法、快速和半干法转印方法蛋白质印迹对比。对比采用12% mPAGE® Lux Bis-Tris凝胶，上样A431人细胞裂解物滴定液，通过各种转印方法转印到Immobilon®-P膜上。使用抗EGFR和抗ErK1/2 抗体转印膜，然后使用Immobilon® ECL Ultra Western HRP底物进行检测。Turbo 方法 = 使用Bio-Rad Trans-Blot® Turbo™转印系统和Trans-Blot® Turbo™转印套装进行转印。

四份mPAGE® Lux凝胶在相同条件下分析A431裂解物时，表现出一致的性能。
在相同条件下运行四份Bis-Tris凝胶蛋白条带，通过计算每个条带未染色分子量标记的迁移距离标准偏差，揭示mPAGE® Lux制胶系统的重现性。

图4：mPAGE® Lux Bis-Tris凝胶的重现性。A. 制备四份8%凝胶并上样A341人细胞裂解物滴定液，随后用ReadyBlue™考马斯凝胶染色剂染色。B. 计算每份凝胶未染色分子量标记的相对迁移距离 (Rf)。揭示每个蛋白质条带的标准偏差。

mPAGE® Lux试剂保质期评估结果表明，其稳定性长达 12 个月。

图 5.mPAGE® Lux Bis-Tris试剂保质期分析。mPAGE® Lux Bis-Tris制胶使用试剂(A) 0 个月、(B) 6个月或(C) 12 个月。运行模式或运行时间上未观测到差异。

mPAGE® Lux制胶系统和Bis-Tris试剂盒

将mPAGE® Lux制胶系统引入实验室，只需3分钟即可制得即用凝胶。深吸一口气，体验快速制胶工艺，减少浪费且无需担心制胶失败。现用现制，立等可取。我们的mPAGE® Lux制胶系统由mPAGE® Lux凝胶设备、mPAGE®混合管、mPAGE®制胶器、10孔和15孔mPAGE®胶梳、mPAGE® Mini间隔板、10孔和15孔mPAGE® Lux特制短板组成。0.75 mm厚mPAGE® Lux制胶系统不含15孔胶梳和特制短板。试剂盒说明及配置如下：

*可选用NEMA 5-15P (YP12)、CEE 7/7 (YP22)、G型 (YP61)、YP18或I (YP03)型塞。
mPAGE® Lux制胶设备

mPAGE® Lux凝胶设备

mPAGE® Lux Bis-Tris试剂盒是mPAGE® Lux制胶系统专用试剂盒。mPAGE® Lux Bis-Tris试剂盒由3部分组成：分离液、稀释剂和浓缩液。该试剂盒支持8.0-13.5%百分比的各式丙烯酰胺凝胶。mPAGE® Lux 试剂盒说明及配置如下：

 mPAGE® Lux SDS-PAGE制胶实验方案

所有溶液必须避免阳光照射，以免聚合。灌胶之前，等待所有溶液恢复至室温。

分离胶

  1. 混合分离液和稀释剂，制备分离胶溶液。关于混合体积，请参阅下表。可大批量制备分离胶溶液，以便连续制备多份凝胶。
  2. 使用洁净的移液管，将分离液加入黑色混合管或其他不透明容器中。
  3. 使用洁净的移液管，将稀释剂加入同一混合管。
  4. 轻轻倒置容器混匀。不可涡旋震荡。

分离胶溶液体积

可按照以下体积用量制备一份1.0 mm凝胶。关于0.75 mm和1.5 mm凝胶的溶液体积，请参阅SigmaAldrich.com产品页面上的完整用户指南。

浓缩胶

浓缩液可直接从瓶子中取出使用。1.0 mm凝胶请使用1.5 mL浓缩液。重要提示：请勿稀释浓缩液。

制胶

  1. 用温和的洗涤剂清洗玻璃板并用去离子水冲洗。使用前用70%乙醇擦拭。
  2. 使用mPAGE®间隔板和 mPAGE® Lux特制短板组装mPAGE®制胶器，形成玻璃制胶装置。特制短板应与制胶装置左侧文字对齐。关闭制胶器之前，确保两块玻璃板在制胶器框架底部对齐。注意：mPAGE® Lux特制短板必须与mPAGE®凝胶设备配套使用。
  3. 按电源按钮打开mPAGE® Lux凝胶设备电源。凝胶设备随即开始自检。自检完成后，出现准备就绪界面。
  4. 打开凝胶设备门，将制胶器放入凝胶设备，确保制胶器与缓冲垫片后端对齐。
  5. 使用洁净的5 mL移液管，将制好的分离胶溶液加入mPAGE®制胶器，直至达到框架上的刻度线。
  6. 使用洁净的5 mL移液管，缓慢加入浓缩液至短板顶部。
  7. 沿一定角度缓慢插入mPAGE®胶梳，以防梳齿下方形成气泡。重要提示：不同孔规格混合可能导致孔内混合不当。使用规范：
    • 10孔梳搭配10 孔mPAGE® Lux特制短板
    • 15孔梳搭配15 孔mPAGE® Lux特制短板
  8. 刮去短板正面的溢出物，以防溢出区域凝胶不完全。
  9. 关闭凝胶设备门并选择凝胶厚度。
  10. 单击“Start”开始凝胶。提示：如果灌制多份凝胶，请在第一份正在凝胶时，用第二个制胶器开始制胶过程。
  11. 凝胶完成后，打开凝胶设备门并取出制胶器。下压拉力夹释放制胶器框架，从制胶器上取下制胶装置。然后打开侧面框架，使制胶装置从顶部滑出。
  12. 凝胶可立即使用，也可用湿纸巾包裹制胶装置存放拉链袋或其他密封容器中，2-8 °C 下最多可存放2周。请勿打开制胶装置，否则凝胶会变干。

电泳后如何去除凝胶

使用凝胶刮刀从玻璃制胶装置中取出凝胶。沿着凝胶边缘切割（右），避免凝胶撕裂。mPAGE® Lux Bis-Tris凝胶仅可与MOPS-SDS或MES-SDS电泳缓冲液配套使用。Bis-Tris凝胶与Tris-Glycine电泳缓冲液不兼容。

使用mPAGE® Lux制胶系统进行可持续制胶

我们致力于提供绿色工作流程解决方案，在帮助客户完成蛋白分离研究的同时，减少废弃物和化学危害。  与传统人工制胶工作流程相比，我们的mPAGE® Lux制胶系统最多可让每份凝胶产生的一次性塑料废物量减少26%，同时缩减制胶所需的时间和步骤。mPAGE® Lux系统还使用光引发剂替代TEMED和APS等危险试剂——无需接触接触这些试剂，也无需管理相关废弃物。快来了解我们的mPAGE® Lux系统的显著省时和环保优势，与我们一道携手创造更具可持续性的未来。

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