微生物培养基制备

微生物培养基制备是将营养物质、缓冲剂和维持渗透平衡的制剂以及选择性抑制剂或指示剂混合在一起,制成支持微生物生长和分化的琼脂或肉汤的过程。微生物培养基制备是微生物检测中定期监测腐败微生物和病原微生物的一项常规工作。
特色类别
培养基的类型
微生物培养基应为所有或特定类型的微生物提供最佳生长条件。培养基的精确成分取决于培养的物种和应用目标。培养基的 pH 值需要根据微生物的情况进行调整。微生物培养基根据化学成分、物理性质和功能等参数进行分类。
按化学成分分类的微生物培养基
合成(定义)培养基是一种具有定义化学成分的培养基,通常用于培养光能自养生物,如蓝藻和光合原生生物。
复合培养基是一种含有非确定化学成分的培养基,如蛋白胨、肉提取物和酵母提取物等,可满足不同微生物的营养需求。
基于物理特性的微生物培养基
固体培养基使用 1-7% 的琼脂-琼脂或 10-20% 的明胶使液体肉汤凝固。固体培养基用于相互分离不同的微生物、建立纯培养物、制作琼脂斜面和琼脂切片。
液体培养基不含任何凝固剂。
基于制备方法的微生物培养基
即用型培养基是装在平板、瓶、管或其他容器中的固体或液体培养基,以即用型形式提供,或在重熔和补充后即用。
用商业脱水制剂制备的培养基是一种干培养基,在使用前需要重新水化和加工,从而得到完整的培养基或在使用前添加补充剂的不完整培养基。
用单个成分制备的培养基是微生物实验室完全用其单个成分制备的培养基。
按需培养基是由一个系统生产的,该系统可在实验室中保持高浓度的无菌培养基数天。
微生物培养基的制备
脱水商业配方的培养基制备应按照制造商的说明进行。基本成分(如蛋白胨、酵母提取物、琼脂、缓冲物质和抗生素)的配方会有所改变,以达到培养基的一致性。将所需数量的脱水培养基或个别成分溶解在蒸馏水中,不断搅拌,然后加热(如有必要)。含有琼脂的培养基在加热前应充分浸泡并适当搅拌。必须调节 pH 值,然后将培养基分装到适当的容器中,在高压灭菌器中进行湿热灭菌。对热敏感的物质(如蛋白质、酶)可使用膜过滤器进行灭菌。
培养基必须在规定的温度下储存,以防止成分发生变化,储存时间不得超过产品保质期。无菌制备和储存对保护培养基免受微生物感染至关重要。通过防渗包装和/或在 5 °C ± 3 °C 下储存,可最大限度地减少储存过程中的水分损失。避免光、热和脱水可延缓化学降解,如氧化或抗菌剂损失。
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