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主页哺乳动物细胞培养细胞培养实验方案1:恰当的无菌技术和细胞无菌处理

细胞培养实验方案1:恰当的无菌技术和细胞无菌处理

ECACC Laboratory Handbook 4th Edition

产品列表

  • 70% (v/v) 乙醇无菌水溶液(793213)
  • 次氯酸钠(425044
细胞的无菌处理

目标

确保所有细胞培养程序都达到一个标准,防止细菌、真菌和支原体污染,以及与其他细胞系的交叉污染。

设备

  • 个人防护装备(无菌手套、实验室外套、护目镜、鞋套、发套)
  • 适当防护水平的生物安全柜

操作流程

  1. 在开始工作前,用70%乙醇消毒安全柜。
  2. 在开始工作前,用70%乙醇喷洒手套并使其风干30秒以消毒。
  3. 在开始工作之前,将所有材料和设备放入安全柜中。安全柜中的设备以及将要在细胞培养操作中放入安全柜的设备(培养基瓶子、移液器吸头盒、移液器辅助设备)在使用前,均应使用浸有70%乙醇的纸巾擦拭。
  4. 工作过程中,请勿触摸安全柜外面的任何东西(特别是脸部和头发),以免污染手套。如果手套受到污染,请按照上述方法重新喷洒70%乙醇,然后再继续操作。
  5. 在处理完受到污染的培养物后以及在完成细胞培养的所有操作之后,丢掉手套。
  6. 在安全柜内部和靠近安全柜的外部的任何移动都不得快速进行。缓慢移动不会打乱安全柜内空气的正常循环。
  7. 说话、打喷嚏和咳嗽时均必须远离安全柜,以免扰乱气流。
  8. 完成工作后,在从安全柜中取出所有设备和材料之前必须先对它们进行消毒。用70%乙醇喷洒安全柜内的工作表面,然后用纸巾擦干。
  9. 液体细胞培养废物应丢弃在次氯酸钠(10,000 ppm)中,并且必须在安全柜中保存至少两小时(最好是过夜)后,才能用大量的水冲入下水道。
  10. 根据制造商的说明,定期用消毒剂清洁安全柜表面或熏蒸安全柜。但是必须确保熏蒸实验室是安全的,因为熏蒸时会产生甲醛气体,请咨询您的现场健康与安全顾问。
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