X-tremeGENE™转染试剂能够可靠地转染多种核酸和CRISPR / Cas9组分,参与这一分子和细胞研究关键步骤。浏览以下最常见的细胞系列表,获取有关使用X-tremeGENE™产品线的详细说明。正在寻求最大限度提高灵活性的方法?新型X-tremeGENE™360转染试剂是一种通用聚合物,非常适合转染常见和难转染细胞系。
以1.5 X 104个细胞/孔的密度铺板CHO-K1 细胞。转染前 18-24 小时(65-75% 汇合度),在100μl 完全生长培养基/孔的 96 孔板中铺板细胞。细胞培养过夜。
等待 X-tremeGENE 9DNA 转染试剂、DNA 和稀释液(Opti-MEM® I 还原血清培养基或无血清培养基)加温至 +15°C 至 +25°C,并轻轻涡旋。
实验结果:应用 X-tremeGENE 9DNA 转染试剂,成功地用 pcDNA3.1-GFP 质粒转染 CHO-K1 细胞。
以8.0 X 103个细胞/孔的密度铺板COS-7细胞。转染前 18-24 小时(75 – 85% 汇合度),在100μl 完全生长培养基/孔的 96 孔板中铺板细胞 。细胞培养过夜。
允许 X-tremeGENE 9DNA 转染试剂、DNA 和稀释液(Opti-MEMR® I 还原血清培养基或无血清培养基)加温至 +15°C 至 +25°C,并轻轻涡旋。
实验结果:应用 X-tremeGENE 9DNA 转染试剂,成功地用 pcDNA3.1-GFP 质粒转染 COS-7 细胞。
以1.5 X 104个细胞/孔的密度铺板HeLa细胞。转染前 18-24 小时(70 – 90%汇合度),在100μl 完全生长培养基/孔的 96 孔板中铺板细胞。细胞培养过夜。
允许 X-tremeGENE 9 转染试剂、DNA 和稀释液(Opti-MEM® I 还原血清培养基或无血清培养基)加温至 +15°C 至 +25°C,并轻轻涡旋。
实验结果:应用 X-tremeGENE 9DNA 转染试剂,成功地用 pcDNA3.1-GFP 质粒转染 HeLa 细胞。
以1.5 X 104个细胞/孔的密度铺板NIH-3T3细胞。转染前 18-24 小时(70 – 80%汇合度),在100μl 完全生长培养基/孔的 96 孔板中铺板细胞。细胞培养过夜。
等待 X-tremeGENE 9DNA 转染试剂、DNA 和稀释液(Opti-MEM® I 还原血清培养基或无血清培养基)加温至 +15°C 至 +25°C,并轻轻涡旋。
实验结果:应用 X-tremeGENE 9DNA 转染试剂,成功地用 pcDNA3.1-GFP 质粒转染NIH-3T3细胞。
以3.0 – 3.5 X 104个细胞/孔的密度铺板HEK-293细胞。转染前 18-24 小时(50 – 70%汇合度),在100μl 完全生长培养基/孔的 96 孔板中铺板细胞。细胞培养过夜。
等待 X-tremeGENE™ HP DNA 转染试剂、DNA 和稀释液(Opti-MEM® I 还原血清培养基或无血清培养基)加温至 +15°C 至 +25°C,并轻轻涡旋。
实验结果:应用 X-tremeGENE™ HP DNA 转染试剂,成功地用 pcDNA3.1-GFP 质粒转染 HEK-293 细胞。
以1.0 – 1.2 X 104个细胞/孔的密度铺板PC-3细胞。转染前 18-24 小时(75 – 85%汇合度),在100μl 完全生长培养基/孔的 96 孔板中铺板细胞。细胞培养过夜。
等待 X-tremeGENE™ HP DNA 转染试剂、DNA 和稀释液(Opti-MEM® I 还原血清培养基或无血清培养基)加温至 +15°C 至 +25°C,并轻轻涡旋。
向稀释的 DNA 中加入2 μL X-tremeGENE™ HP DNA 转染试剂。(试剂与 DNA 的比例为 1:1 )。轻轻吹打混匀。
+15°C 至 +25°C 孵育 15-30 min。
实验结果:应用 X-tremeGENE™ HP DNA 转染试剂,成功地用 pcDNA3.1-GFP 质粒转染 PC-3 细胞。
以3.0 – 4.0 X 105个细胞/孔的密度铺板HCT 116细胞。转染前 18-24 小时 (80%汇合度),在1 mL 完全生长培养基/孔的12孔板中铺板细胞。细胞培养过夜。
等待 X-tremeGENE™ HP DNA 转染试剂、DNA 和稀释液(Opti-MEM® I 还原血清培养基或无血清培养基)加温至 +15°C 至 +25°C,并轻轻涡旋。
以2.8 X 104个细胞/孔的密度铺板A549细胞。转染前 18-24 小时(70%汇合度),在150μl 完全生长培养基/孔的 96 孔板中铺板细胞 。细胞培养过夜。
等待 X-tremeGENE™ HP DNA 转染试剂、DNA 和稀释液(Opti-MEM® I 还原血清培养基或无血清培养基)加温至 +15°C 至 +25°C,并轻轻涡旋。
将500 μL 稀释液置于无菌试管中。
加入5 μg 质粒 DNA。轻轻吹打混匀。
以1.2 – 1.8 X 104个细胞/孔的密度铺板MCF-7细胞。转染前 18-24 小时(70 – 90%汇合度),在100μl 完全生长培养基/孔的 96 孔板中铺板细胞。细胞培养过夜。
等待 X-tremeGENE 9DNA 转染试剂、DNA 和稀释液(Opti-MEM® I 还原血清培养基或无血清培养基)加温至 +15°C 至 +25°C,并轻轻涡旋。
实验结果:应用 X-tremeGENE 9DNA 转染试剂,成功地用 pcDNA3.1-GFP 质粒转染 MCF-7 细胞。
以1.0 X 105个细胞/孔的密度铺板HuH-7细胞。转染前 18-24 小时,在2.5 mL完全生长培养基/孔的 6 孔板中铺板细胞 。细胞培养过夜。
等待 X-tremeGENE™ HP DNA 转染试剂、DNA 和稀释液(Opti-MEM® I 低血清培养基或无血清培养基)加温至 +15°C 至 +25°C,并轻轻涡旋。
以2.5 – 3.0 X 104个细胞/孔的密度铺板 U-2 OS细胞。转染前 18-24 小时(70 – 90%汇合度),在100μl 完全生长培养基/孔的 96 孔板中铺板细胞 。细胞培养过夜。
等待 X-tremeGENE™ HP DNA 转染试剂、DNA 和稀释液(Opti-MEM® I 低血清培养基或无血清培养基)加温至 +15°C 至 +25°C,并轻轻涡旋。
实验结果:应用 X-tremeGENE™ HP DNA 转染试剂,成功地用 pcDNA3.1-GFP 质粒转染U-2 OS细胞。
以2.0 – 2.5 X 104个细胞/孔的密度铺板HepG2细胞。转染前 18-24 小时(60 – 70%汇合度),在100μl 完全生长培养基/孔的 96 孔板中铺板细胞。细胞培养过夜。
等待 X-tremeGENE 9DNA 转染试剂、DNA 和稀释液(Opti-MEM® I 低血清培养基或无血清培养基)加温至 +15°C 至 +25°C,并轻轻涡旋。
实验结果:应用 X-tremeGENE 9DNA 转染试剂,成功地用 pcDNA3.1-GFP 质粒转染 HepG2 细胞。
客户提供的实验方案。
以1.0 X 105个细胞/孔的密度铺板Neuro-2a细胞。转染前24 小时(30 – 40%汇合度),在500μl 完全生长培养基/孔的 24 孔板中铺板细胞。细胞培养过夜。
等待 X-tremeGENE 9DNA 转染试剂、DNA 和稀释液(Opti-MEM® I 低血清培养基或无血清培养基)加温至 +15°C 至 +25°C,并轻轻涡旋。
注意:“客户提供的方案”中包含的数据和实验条件由提交它们的客户独自负责。罗氏既没有参与建立实验条件,也没有参与制定具体分析性能的标准。因此,罗氏不对作者或其他使用类似实验方法表述的用户所描述的生物目标参数所获得的结果的性能或解读承担任何责任。
实验结果:用 X-tremeGENE 9DNA 转染试剂成功地用 CMV6-GFP 质粒转染 Neuro-2a 细胞。
以0.5 – 1.0 X 105个细胞/孔的密度铺板原代 MEF细胞。转染前 18-24 小时 (60%汇合度),在1 mL 完全生长培养基/孔的12孔板中铺板细胞。细胞培养过夜。
等待 X-tremeGENE™ HP DNA 转染试剂、DNA 和稀释液(Opti-MEM® I 还原血清培养基或无血清培养基)加温至 +15°C 至 +25°C,并轻轻涡旋。
以1.0 X 105个细胞/孔的密度铺板人原代成纤维细胞。转染前 18-24 小时,在2 mL完全生长培养基/孔的 6 孔板中铺板细胞(40 – 50%汇合度)。细胞培养过夜。
等待 X-tremeGENE™ HP DNA 转染试剂、DNA 和稀释液(Opti-MEM® I 低血清培养基或无血清培养基)加温至 +15°C 至 +25°C,并轻轻涡旋。
实验结果:应用 X-tremeGENE™ HP DNA 转染试剂,成功地用 GFP编码质粒转染人原代成纤维细胞。
以3.0 X 104个细胞/孔的密度铺板EK8细胞。转染前 18-24 小时(50%汇合度),在100 mL 完全生长培养基/孔的96孔板中铺板细胞 (3 X 105细胞/mL)。细胞培养过夜。
等待 X-tremeGENE™ HP DNA 转染试剂、DNA 和稀释液(Opti-MEM® I 低血清培养基或无血清培养基)加温至 +15°C 至 +25°C,并轻轻涡旋。
以8.0 X 104个细胞/孔的密度铺板hMSC。转染前 18-24 小时(50%汇合度),在2 mL 完全生长培养基/孔的6孔板中铺板细胞 。细胞培养过夜。
等待 X-tremeGENE™ HP DNA 转染试剂、DNA 和稀释液(Opti-MEM® I 还原血清培养基或无血清培养基)加温至 +15°C 至 +25°C,并轻轻涡旋。
实验结果:利用 X-tremeGENE HP DNA 转染试剂,成功地用 GFP 编码质粒转染人间充质干细胞。
以5.0 X 105个细胞/孔的密度铺板HEK-293T细胞。转染前 18-24 小时,在2 mL完全生长培养基/孔的 6 孔板中铺板细胞(60 – 80%汇合度)。细胞培养过夜。
等待 X-tremeGENE™ HP DNA 转染试剂、DNA 和稀释液(Opti-MEM® I 低血清培养基或无血清培养基)加温至 +15°C 至 +25°C,并轻轻涡旋。
实验结果:应用 X-tremeGENE™ HP DNA 转染试剂,成功地用 pGIPZ-eGFP 质粒转染 HEK-293T 细胞。
以0.5 X 106个细胞/孔的密度铺板SF9细胞。临转染前,在1 mL完全生长培养基/孔的 12 孔板中铺板细胞 。细胞培养过夜。
等待 X-tremeGENE™ HP DNA 转染试剂、DNA 和稀释液(Opti-MEM® I 低血清培养基或无血清培养基)加温至 +15°C 至 +25°C,并轻轻涡旋。
请注意,上述实验方案仅作建议,必须依据经验确定最佳条件。
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