约转染前24小时接种细胞,确保细胞处于最佳密度(70–90 %融合度)。
待X-tremeGENE™ 9 DNA转染试剂、DNA和稀释液(Opti:MEMR® I减血清培养基或无血清培养基)回温至 +15°C 至 +25°C,并轻轻涡旋振荡。
X-tremeGENE™ 9 DNA转染试剂保存在 +2至+8℃温度下, X-tremeGENE™ HP DNA 转染试剂保存于
-15至-25℃温度下。
将盛有 X-tremeGENE DNA 转染试剂的小瓶置于 +15~+25°C温度下,涡旋 1 秒钟,然后取出所需量。
请勿将 X-tremeGENE DNA 转染试剂分装;将剩余的转染试剂储存在原始玻璃瓶中。
尽量减少未稀释的 X-tremeGENE DNA 转染试剂与塑料表面的接触。
取出所需量后,使用后立即紧扣小瓶盖。
X-tremeGENE DNA 转染试剂的最小用量:用于转染的 DNA 复合物是 100μl。较低体积的复合物形成过程显著降低转染效率。
请勿将聚苯乙烯制成的试管或微孔板用于 X-tremeGENE DNA 转染试剂:DNA 复合物制备。当不能避免使用聚苯乙烯材料时,一定要将转染试剂直接移液到无血清培养基中,或加入低血清培养基(不含任何血清)。
请勿使用含硅吸头或吸管。
确定转染时细胞仍在活跃生长。
通过加入含下列内容的微孔,在进行转染时加入适当的对照品:
(1) 未转染细胞
(2) 只带转染试剂的细胞
(3) 仅带 DNA 的细胞
转染试剂的最佳配比:DNA 和复合物的最佳总量可能随着细胞系、细胞密度、用于测定的细胞生长状态和基因表达的不同而变化。
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