转染细胞准备
约转染前24小时接种细胞,确保细胞处于最佳密度(70–90%融合度)。
转染前步骤
- 待X-tremeGENE™ HP DNA转染试剂、DNA和稀释液(Opti:MEM®I减血清培养基或无血清培养基)回温至 +15°C 至 +25°C,并轻轻涡旋。
- 稀释液加入无菌试管中。
- 加入质粒DNA。轻轻地上下吹打混匀。
- 向稀释的DNA中加入X-tremeGENE™ HP DNA转染试剂。
- +15°C 至 +25°C 孵育 15 min。
- 逐滴向细胞中加入转染复合物。
- 轻轻摇动或旋转培养孔或培养瓶,确保整个培养板上分布均匀。
- 在测量蛋白表达之前,将细胞孵育 18-72 小时。