跳转至内容
Merck
CN
主页微生物细胞培养链球菌 — 检测、鉴定、分化和培养技术概述

链球菌 — 检测、鉴定、分化和培养技术概述

Jvo Siegrist

AnalytiX Volume 7 Article 3

链球菌是一种非能动、微量需氧的革兰氏阳性球形菌(球菌)。它们通常以链或成对的形式出现,并且是兼性或严格的厌氧菌。链球菌在过氧化氢酶试验中呈阴性,而葡萄球菌为过氧化氢酶阳性。链球菌种的细胞分裂涉及两个独立的生物合成事件:外周细胞壁的伸长和间隔壁的合成。1 由于不能合成细胞色素,因此链球菌不能进行氧化磷酸化。它们能够发酵糖,但最终产品始终是乳酸。因此,链球菌非常耐酸,属于乳酸菌目。

链球菌有许多天然来源,包括人类和多种动物,它们常常在口腔、肠道、鼻腔和咽部的粘膜表面生存。如果饮用水中存在链球菌,表明水受到粪便污染。链球菌污染风险高的食物源包括奶和奶制品、鸡蛋、蒸龙虾、碎肉火腿、土豆沙拉、果冻、米布丁和虾沙拉。在大多数链球菌食物中毒病例中,从准备食物直到食用食物,食物通常置于室温下数小时。食物污染最常见的原因是卫生条件差,感染者对食物的处理,或未经巴氏灭菌的牛奶的食用所致。虽然链球菌可能是潜在的致病菌,但是有些链球菌对于奶酪和酸奶的生产却具有商业价值。这些细菌包括乳酸链球菌、乳脂链球菌、双醋酸乳链球菌和嗜热链球菌,后者最为人所知。

对于链球菌的检测、鉴定、分化、计数和培养,Sigma-Aldrich提供了广泛的特定琼脂和肉汤(表1)、链球菌诊断测试(表2)以及革兰氏染色试剂盒和组分溶液(表3)。

链球菌

链球菌的科学分类

界:细菌界
门:厚壁菌门
纲:杆菌纲
目:乳杆菌目
科:链球菌科
属:链球菌属

基于溶血活性的链球菌分组

根据其溶血(红血细胞裂解)活性,链球菌被分为三组。溶血反应可以在血琼脂板上观察,例如表1中列出的非选择性分化琼脂。

非选择性营养肉汤

货号品牌描述
53286Sigma-Aldrich脑心浸液肉汤
B2551Sigma-AldrichBrewer巯基乙酸盐培养基
22089Sigma-Aldrich酪蛋白蛋白胨卵磷脂聚山梨醇酯肉汤
22098Sigma-AldrichCASO肉汤
60865Sigma-Aldrich熟肉汤
17123Sigma-AldrichElliker肉汤
5121Sigma-Aldrich心脏浸液肉汤
70122Sigma-Aldrich1号营养肉汤
70149Sigma-Aldrich3号营养肉汤
40893Sigma-AldrichVegitone磷酸盐缓冲的蛋白胨水
70179Sigma-Aldrich蛋白胨水
77187Sigma-Aldrich磷酸盐缓冲的蛋白胨水
S4681Sigma-Aldrich标准1号营养肉汤
85905Sigma-AldrichStuart Ringertz培养基
90404Sigma-Aldrich含刃天青的巯基乙酸盐肉汤
T1438Sigma-AldrichTodd Hewitt肉汤
22092Sigma-Aldrich胰蛋白酶黄豆肉汤
51228Sigma-Aldrich2号胰蛋白酶黄豆肉汤
41298Sigma-AldrichVegitone胰蛋白酶黄豆肉汤
T3938Sigma-Aldrich不含葡聚糖的胰蛋白胨黄豆肉汤
T4407Sigma-Aldrich胰蛋白眎肉汤
V5262Sigma-Aldrich小牛浸液肉汤

选择性营养肉汤

货号品牌描述
17157Sigma-Aldrich叠氮化物葡萄糖肉汤

用于培养、计数和分离的非选择性琼脂

货号品牌描述
A3340Sigma-AldrichAC琼脂
70138Sigma-Aldrich脑心脏浸液琼脂
22095Sigma-AldrichCASO琼脂
27688Sigma-Aldrich哥伦比亚琼脂
D3060Sigma-Aldrich葡聚糖淀粉琼脂
D8184Sigma-Aldrich诊断灵敏度测试琼脂
70147Sigma-Aldrich乳汁琼脂
70148Sigma-Aldrich琼脂培养基
17197Sigma-Aldrich胨化乳汁琼脂
70152Sigma-Aldrich计数琼脂板
88588Sigma-Aldrich根据Buchbinder等人的文章设计的计数琼脂板
19718Sigma-AldrichVegitone计数琼脂板
17257Sigma-Aldrich嗜热链球菌分离琼脂
22091Sigma-Aldrich胰蛋白酶黄豆琼脂
14432Sigma-AldrichVegitone胰蛋白酶黄豆琼脂
51414Sigma-Aldrich含有聚山梨醇酯80和卵磷脂的胰蛋白酶黄豆琼脂
70159Sigma-Aldrich胰蛋白胨葡萄糖提取物琼脂
T2313Sigma-Aldrich胰蛋白眎琼脂

分化用非选择性琼脂

货号品牌描述
70133Sigma-Aldrich血琼脂(基础)
B1676Sigma-Aldrich血琼脂基础2号
55420Sigma-Aldrich氯化琼脂
70136Sigma-Aldrich脱氧核糖核酸酶测试琼脂
D2560Sigma-Aldrich含有甲苯胺蓝的脱氧核糖核酸酶测试琼脂
17153Sigma-AldrichLS鉴别琼脂

分化、检测和分离用的带鉴别系统的选择性琼脂

货号品牌描述
06105Sigma-Aldrich胆汁七叶甙叠氮化物琼脂
17151Sigma-Aldrich卡那霉素七叶甙叠氮化物琼脂
01337Sigma-Aldrich轻型唾液链球菌琼脂

敏感性测试用培养基

货号品牌描述
97580Sigma-Aldrich2号Mueller-Hinton琼脂
表1链球菌的培养基

α-溶血性链球菌

在α溶血反应中,红细胞保持完整,但血红蛋白转化为胆绿素。这导致菌落周围的血琼脂板变深绿。

  • 肺炎双球菌
    肺炎链球菌:引起细菌性肺炎、中耳炎和脑膜炎。肺炎链球菌对奥普托欣(乙基氢化叩卜林盐酸盐)的敏感性是诊断测试的基础(图1,表2)。
肺炎球菌

图 1.革兰氏阳性球菌的分化和鉴定流程图

货号品牌描述
88597Sigma-Aldrich过氧化氢酶试验
08382Sigma-Aldrich杆菌肽片
74042Sigma-Aldrich奥普托欣片
67886Sigma-Aldrich吡咯烷酮肽酶(PYRase)条
表 2用于鉴定和分化链球菌的诊断测试
  • Viridans和其他
    变形链球菌:与龋齿有关。
    草绿色绿链球菌:心内膜炎和牙脓肿的致病因子。
    唾液链球菌:被认为是一种机会致病菌。
    唾液链球菌嗜热亚种:用于生产奶酪和酸奶。

β-溶血性链球菌

β溶血反应是溶血素酶对红细胞的完全溶血。血琼脂板上的菌落周围会出现无色区域。使用识别表面碳水化合物抗原(例如A、B等)的特异性抗体将β-溶血性链球菌进一步分为若干血清学组。

  • A组
    化脓性链球菌:引起感染,如链球菌性咽喉炎、急性风湿热、猩红热、急性肾小球肾炎和坏死性筋膜炎。它对杆菌肽敏感(图1),这是在链球菌诊断测试中使用的一个事实(表2)。其他链球菌物种也可能具有A组抗原,但不是人类病原体。这些包括停乳链球菌似马亚种咽峡炎链球菌菌株。
  • B组
    无乳链球菌:引起新生儿和老年人的脑膜炎。它们偶尔生存于女性生殖道,会增加胎膜早破和感染给胎儿的风险。
  • C组
    马链球菌:造成马匹腺疫感染。
    兽疫链球菌:造成牛、马和其他哺乳动物感染。
  • D组(肠球菌)
    许多以前属于D组的链球菌已被重新分类为肠球菌属(例如肠链球菌、表面链球菌、坚忍链球菌、鸟链球菌)。
    牛链球菌和猪链球菌:仍属于D组链球菌

非溶血性或γ-溶血性链球菌

γ溶血是用词不当,因为实际上没有溶血反应。非溶血性或γ-溶血性链球菌很少致病。

货号品牌描述
77730Sigma-Aldrich革兰氏染色试剂盒
94448Sigma-Aldrich革兰氏晶紫溶液
75482Sigma-Aldrich革兰氏脱色剂溶液
87794Sigma-Aldrich革兰氏品红溶液
90107Sigma-Aldrich革兰氏碘溶液
94635Sigma-Aldrich革兰氏番红溶液
表3革兰氏染色试剂盒及组分溶液

产品列表

Loading

参考文献

1.
Beilharz K, Novakova L, Fadda D, Branny P, Massidda O, Veening J. 2012. Control of cell division in Streptococcus pneumoniae by the conserved Ser/Thr protein kinase StkP. Proceedings of the National Academy of Sciences. 109(15):E905-E913. https://doi.org/10.1073/pnas.1119172109
登录以继续。

如要继续阅读,请登录或创建帐户。

暂无帐户?