解析体外诊断试剂
微球篇
随着奥密克戎变异株在中国多省市疯狂席卷,新冠疫情的紧张气氛再度升温。为了进一步优化新冠病毒检测策略,服务疫情防控需要,国务院于3月10日紧急颁布《新冠病毒抗原检测应用方案》,在核酸检测基础上,增加抗原检测作为补充。
目前获批的产品都是基于侧向免疫层析技术进行开发的。小小一张试纸条从可见的硬件到肉眼不可见的试剂,都蕴含着缜密的设计和高品质的原料。解构侧向层析检测各个部件,大致可分为如下四类:侧向层析膜材、检测系统标记物、抗体及辅助试剂。
目前层析技术主流的抗原/抗体标记物包括胶体金、彩色微球、荧光微球等,后两者与传统的胶体金相比,具有良好的稳定性,线性范围宽,灵敏度高等优势。
Estapor®彩色纳米微球
彩色微球粒径非常均一,染料镶嵌在微球内部(微球表面属性无改变),在尽量保持色彩鲜艳,而且染料不会渗出到水或者缓冲液中。通过使用不同颜色的彩色微球可以一次性检测多个指标,实现多重检测的目的。对于全血样本,可以选择黑色或深蓝色微球;血清的样本可以选择鲜红色或蓝色微球;尿液样本选择更多,可用蓝色、红色、绿色或黑色微球;唾液和脑脊液的样本推荐使用黑色或深蓝色微球;对于食品安全类的检测,建议选择深色微球。
Estapor®荧光纳米微球
荧光稳定性良好的荧光微球具有专利保护。由聚苯乙烯(PS)或聚甲基苯乙烯(PVT)制得的荧光微球具有单分散性好、粒径均一的特点,为了防止荧光淬灭,提供尽可能大的活性表面,我们使用物理方法将荧光染料不可逆地包埋在粒子内部。
XC染料的激发和发射光谱图
每个峰上标注了最大激发和发射波长。注意:XC非常适合氩激光器488nm波长
Estapor®同时提供时间分辨荧光微球,相比XC型荧光纳米微球具有斯托克斯位移大;检测灵敏度高;尺寸均一性优(CV<3%);批间重复性佳;性价比高(用量仅为XC型荧光微球的1/10)等优势
胶体金
胶体金是定性侧向层析检测中最为常用的标记物。制备时由四氯金酸在还原剂如柠檬酸钠等作用下,聚合成为特定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,称为胶体金。质量优良的胶体金溶液呈现酒红色,颗粒形状为球形,大小均一,无棱角。质量差的溶液多呈蓝紫色,大小不一,形状各异。抗原/抗体与胶体金的结合方式主要有以下三个模式:
• 离子结合:胶体金颗粒经过柠檬酸钝化后很容易与蛋白上的赖氨酸残基结合。
• 疏水结合:疏水蛋白通过疏水键与胶体金颗粒的结合,加入表面活性剂会破坏蛋白与胶体金的疏水结合。
• 硫金键:是金颗粒与抗原/抗体之间最重要的结合方式,因此胶体金溶液中应避免使用含有硫汞等含硫类防腐剂。
侧向层析检测试纸条适用于临床诊断应用,分析方便、快捷、经济。侧向层析检测领域的进展主要体现在分析物检测灵敏度方面。定量检测通常使用有机荧光基团来提高灵敏度。Estapor® 微球具有的可靠性使其成为检测试剂的理想选择,无论您的检测试剂是定量还是定性检测。
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