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活细胞成像
秘籍在此So Easy!


我们经常用到的PCR、ICC及IHC等技术只能“抓拍”细胞的某一瞬间,但无法记录动态过程。

 

因此,近年来活细胞成像和分析技术在生物学的各个领域发挥着越来越关键的作用。利用这个技术,可以对动态的细胞事件(例如细胞的行为、生长和分化、细胞间互作等)进行实时研究,这是决定实验成败的关键第一步。

 

那么如何选择正确、合适的荧光染料用于细胞追踪和成像呢?

 

荧光细胞追踪染料, 结合流式和图像细胞计数是非常强大的工具,可用于体内和体外研究不同细胞类型的互作和命运。尽管有成千上万已发表文献在使用这些染料,但使用最广泛的细胞示踪应用包括监控:

1) 干细胞和祖细胞静止、增殖和/ 或分化

2) 抗原驱动的膜传递和/ 或前体细胞增殖

3) 免疫调控和效应细胞功能

 

商品化的细胞追踪染料因其化学和荧光性质不同具有非常广泛的类型,但绝大多数可基于细胞标记机理分为两类:“膜染料”(典型代表:PKH26)是高度亲脂性的染料,稳定但非共价地插入细胞膜;“蛋白染料”(典型代表:CFSE)是氨基酸反应性染料,与细胞蛋白形成稳定的共价键。

 

原理:

PKH 和CellVue® Fluorescent Cell Linker Kits 荧光细胞标记试剂盒可为长时间的活细胞成像实验提供活细胞荧光膜标记。默克试剂盒采用专利的创新细胞标记技术,强烈的荧光染料附着在长的亲脂性尾上,在短期的常规膜染色过程中(1-5 分钟),亲脂性尾扩散入细胞膜,荧光部分暴露在细胞的外表面附近。

 

优势:

活细胞标记:标记细胞膜,可在体内和体外对标记细胞进行实时观察和跟踪

无毒副作用:标记物质对细胞无毒性,不影响细胞的形态、生理进程、增殖活力

荧光稳定持久:荧光强烈易操作,无明显染料渗漏或细胞间转移,荧光染料在体内活细胞上的半衰期长达100 天

数据稳定:细胞标记统一、数据可重复性强

应用广泛:可标记真核细胞和细胞系、细菌和寄生生物,不同染料可实现多色分析,且与其他荧光标记兼容

久经验证:经过多种细胞类型和应用验证,已发表文献近万篇