流式细胞术_流式细胞仪及试剂_蛋白质生物学-默克生命科学

流式抗体及标记

流式细胞分析需要使用各种流式抗体和标记。在实验中，流式抗体可特异性地结合不同细胞标记物，帮助鉴定细胞类型并评估任何蛋白表达变化。根据实验设计，可选择多种标记在流式细胞仪中可视化待测抗体，包括核酸染料、细胞活力染料、聚合物染料、量子点、小有机分子和荧光蛋白。抗体通常直接结合（借助市售产品或允许最终用户执行反应的结合试剂盒）标记，或通过二抗标记。现有一种全新的专利流式细胞技术，允许终端用户灵活混合匹配独立选择的抗体和染料，并将其随意组合——无需结合试剂盒或二抗。

流式细胞术应用

流式细胞术应用于许多研究领域，常用于分析不同细胞群中的多个参数。常见的分子生物学应用包括，重组表达荧光蛋白分析，即在多种类型的细胞中诱导这类蛋白表达，从而探究基因功能或进行体内细胞示踪。可借助DNA染色技术进行细胞周期分析，更可利用各种抗体开展更广泛的分析，包括信号转导、RNA和蛋白质表达。但免疫表型分型是流式细胞术最常见的应用之一。在免疫表型分型过程中，可利用结合荧光染料的抗体靶向多种细胞表面抗原，从而鉴定细胞群内的特定免疫细胞。

流式细胞术数据分析

流式细胞术数据分析通常涉及细胞或簇的特定区域鉴定，并需要在实验中运用其他参数（包括研究是否存在其他细胞鉴定因子）以进一步了解细胞类别。许多计算机软件程序可用于此类数据分析和其他细胞周期分析。

流式细胞仪

流式细胞仪内使用的主要组件汇总（包括电子、光学和射流器件）。射流器件用作将样品引导至光学组件的液体输送系统，由激发光学器件（激光器）和收集光学器件（由光电二极管和光电倍增管（PMT））组成。其中关键的是，电子器件可将来自检测器的信息转换为计算机可解读的数字信号。其可结合其他系统开展更深入的样品分析，如纯化和收集样品的细胞分选仪，以及集流式细胞仪和荧光显微镜于一体的多色成像细胞仪。