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抗生素——植物组织培养方案

一般来说,抗生素需要冷藏或冷冻保存。氨基糖苷类抗生素(如卡那霉素)易吸湿,应存放在干燥器中。许多粉剂抗生素不推荐存储于-20°C,而且会增加凝结水的风险。所有的抗生素应避光保存。利福平和两性霉素B对光非常敏感,应存放在无光处。

抗生素容器的标签通常以μg/ mg或单位/ mg粉末的形式表示产品的活性(效能,每份粉末的活性物质的量)。某一抗生素的药粉用量会根据产品的活性而变化。例如,如果某种产品的活性为1000单位/毫克,则需要的粉末量是活性为2000单位/毫克的同一产品的两倍。

抗生素的使用量(mg)、粉末的活性(μg/ mg或单位/ mg)、制备所用溶液的体积(ml)、以及所需抗生素的浓度(μg/ ml) 之间的关系是:

使用量 = (体积 x 浓度) / 活性

大多数抗生素溶液在-0℃可稳定保存长达3个月。然而,利福平每次需在临用前现配。大多数抗生素是不耐热的,应使用吸附最低的滤膜(如醋酸纤维素膜)过滤灭菌。

选定抗生素的制备

制霉菌素的制备(产品编号N9767)

制霉菌素是一种由链霉菌(Streptomyces spp)产生的抗真菌剂。本品为水悬浮液,具有杀菌抑菌活性。制霉菌素仅微溶于水和酒精。用少量二甲基亚砜(DMSO)对粉末表面进行消毒(使粉末湿润),然后将粉末悬浮在无菌水中,制备无菌悬浮液。本操作程序应在无菌条件下使用无菌设备(玻璃器皿等)进行

制霉菌素制剂具有热不稳定性。水悬浮液应避光保存于-0 °C。制霉菌素悬浮液pH值应在6.5-8.0左右,在pH低于2.0或高于9.0则会降解。

羧苄青霉素的制备(产品编号C3416)

羧苄青霉素是一种白色到灰白色的吸湿性粉末,可溶于水或酒精。羧苄青霉素对革兰氏阴性菌的抑制作用最高,但对革兰氏阳性菌也有一定的抑制作用。据报道,羧苄青霉素水溶液可在室温下稳定保存长达24小时,并且可在0 - 5°C下稳定保存长达72小时。

头孢噻肟的制备(产品编号C7039)

头孢噻肟是一种白色到灰白色粉末,可完全溶于水。新配制溶液颜色的变化并不一定代表效力的变化。将本品避光保存于密闭容器中。头孢噻肟的水溶液可在pH值4.3-6.2,0-5°C条件下稳定保存14-21天。头孢噻肟对革兰氏阴性菌最有效。

G418硫酸氢盐(产品编号G1279)

虽然它与庆大霉素有关,但G418硫酸氢盐通常不作为标准抗生素使用。它最常见的应用是在分子生物学中作为筛选剂。硫酸氢盐对细菌、酵母、原生动物、蠕虫和哺乳动物细胞均有毒性。抗性是由两个细菌起源的显性基因之一赋予的,这些基因可以在真核细胞中表达。

G418硫酸氢盐为水溶性盐,常温保存可达1年之久。水溶液应冷冻保存。筛选所需的G418硫酸氢盐的量会随着细胞类型和生长周期的不同而变化。虽然增殖中细胞比没有增殖的细胞更早受到影响,但是处于指数生长期的细胞仍然需要3到7天的时间进行筛选。

潮霉素B(产品编号 H9773)

潮霉素B是一种氨基糖苷类抗生素,对原核和真核微生物及细胞有较强的杀伤作用。与G418硫酸氢盐相似,它的最常见的应用是在分子生物学中作为筛选剂。用编码潮霉素B磷酸转移酶的hph基因转化的昆虫和哺乳动物细胞对潮霉素B具有抗性。潮霉素B以粉末状提供。作为筛选剂的推荐使用浓度范围为10-400 µg/ml。

原核细胞 - 100 µg/ml
低等真核细胞 - 200 µg/ml
高等真核细胞 - 150-400 µg/ml

有关更具体的应用信息,请参阅有关的科学文献。


 

抗生素参考指南

XX = 对大部分物种有效
X = 对特定物种有效

1应用关键词:CC =愈伤组织培养;PR =植物再生;EC =子叶、下胚轴或叶盘培养物;

TS = 转化体筛选;SSC = 茎段培养;PC = 原生质体培养;TEC = 块茎外植体培养;

STM = 茎尖微体繁殖

抗真菌剂参考指南

XX= 对大部分物种有效
X= 对特定物种有效

1应用关键词:CC =愈伤组织培养;PR =植物再生;EC =子叶、下胚轴或叶盘培养物;

TS = 转化体筛选;SSC = 茎段培养;PC = 原生质体培养;TEC = 块茎外植体培养;

STM = 茎尖微体繁殖

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