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主页干货资讯 用合成的sgRNA改进CRISPR介导的基因编辑

用合成的sgRNA
改进CRISPR
介导的基因编辑


MRC Harwell是一个国际小鼠遗传学中心,提供基因组编辑和验证服务,为研究人员建立新的小鼠模型。他们每年进行150+个基因组编辑项目,使他们成为CRISPR方法论的专家。

 

MRC Harwell的研究人员已经使用体外转录在内部产生了sgRNAs,并在他们的项目中使用了合成的sgRNAs。为了评估质量,MRC Harwell的研究人员使用一个结合了模板和靶序列以及Cas9核酸酶的体外系统,比较了IVT sgRNAs和合成sgRNAs的切割效率。在体外,IVT sgRNAs大约30-40%有效,而合成sgRNAs高得多,为 80-90%。

 

 

通过比较每个实验组中13-32个不同的CRISPR项目,研究人员发现,在将靶向突变引入胚胎方面,合成sgRNA比IVT sgRNA明显更有效。IVT的存活率更高,但这可能是由于较低的突变率,因此更大比例的野生型幼崽不携带影响其生存能力的突变。  

 

综上所述,很明显,合成的sgRNAs以相似的时间和成本投资提供了更卓越的质量,使它们成为基因组编辑项目的一个有吸引力的选择

 

产品保证 

 

默克生命科学对 PURedit™ sgRNA 产品性能充满信心,包括定制序列。如果您的 sgRNA没有在预期的靶位点产生可检测的切割,我们将免费为您提供一次性替换。 

 

为享受此替换服务,只需给oligotechserv@merckgroup.com发电子邮件, 并附上一张同一实验中使用我们阳性对照品结果与您的sgRNA向导中的阴性结果的并排图像或 具代表性实验(T7E1、TIDE或NGS)的样本数据。