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Merck
CN

17-10035

Sigma-Aldrich

CpG MethylQuest DNA分离试剂盒

The CpG MethylQuest DNA Isolation Kit allows for simple, effective & rapid enrichment of methylated DNA from genomic samples.

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关于此项目

UNSPSC代码:
12161503
eCl@ss:
32161000
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种属反应性(根据同源性预测)

all

制造商/商品名称

Chemicon®
CpG MethylQuest®

应用

genomic analysis

运输

wet ice

一般描述

CpG MethylQuest DNA分离试剂盒可简单、有效和快速地从基因组样品中富集甲基化DNA。具有预先结合在磁珠上的高亲和重组甲基结合域(MBD)蛋白,一个快速的方案和一个简单的洗脱程序,可以产生可用于下游分析的甲基化DNA,这种高亲和力试剂盒可以从低至1 ng的DNA中富集甲基化 DNA!

CpG MethylQuest优势
  • 可特异性富集甲基化DNA片段
  • 未检测到未甲基化或半甲基化区域的结合
  • 简单快速的基于磁珠的2小时方案
  • GST-MBD2b捕获预先结合到磁珠上的蛋白可获得一致的结果
  • 从1 ng到1 μg DNA的可靠性能
  • 洗脱即用型DNA&避免了额外降低产量的纯化步骤
经5′端的胞嘧啶甲基化为鸟嘌呤对许多真核基因的表达具有深远的影响。在正常细胞中,甲基化主要发生在CG贫乏区域,而富含CG的区域(称为CpG岛)则保持未甲基化状态。其中例外的是,CpG岛的广泛甲基化与印记基因和女性无活性X染色体上的基因调节区的转录失活有关。在永生化和转化的细胞中,正常未甲基化的CpG岛的异常甲基化已被报道为一个相对频繁的事件,并且与人类癌症中已定义的肿瘤抑制基因的转录失活有关。

为了评估特定基因座或整个基因组的甲基化状态,分离和富集甲基化DNA可能是有用的第一步。为了实现这种富集,CpG MethylQuest DNA分离试剂盒利用了预先结合到磁珠上的高亲和力GST-MBD蛋白。

该纯化的重组蛋白包含小鼠MBD2b蛋白的甲基结合结构域(MBD),该结构域与来自日本血吸虫的谷胱甘肽-S-转移酶蛋白(GST)融合,该谷胱甘肽-S-转移酶凝血酶(GST)被含有凝血酶切割位点的接头隔开。 来自MBD2b蛋白的MBD在已知的甲基CpG结合蛋白中对Me-CpG位点具有最高的亲和力,并且与未甲基化的CpG序列具有最低的交叉反应性(Fraga M.F., et al. (2003).Nuc.Acids Res, 31, 1765–1774)。
这些特性使甲基化区域非常特异性地富集。
除了其对甲基化DNA的高亲和力外,CpG MethylQuest蛋白与甲基化CpG结合,而与序列无关。这与使用诸如MeCP2之类的蛋白质分离甲基化DNA相反,后者需要在CpG位点附近运行A-Ts。与甲基化CpG位点结合的无关序列的高亲和力和非甲基化位点的极低亲和力的组合可识别出更多的甲基化CpG位点,从而可以对整个基因组中的甲基化模式进行全面分析。

应用

研究类别
表观遗传学&核功能

其他说明

CpG MethylQuest结合缓冲液

CpG MethylQuest 带有预结合重组MBD蛋白的磁珠

CpG MethylQuest清洗缓冲液1

CpG MethylQuest清洗缓冲液2

TE缓冲液

对照HeLa DNA 110 ng,MseI开口,2ng/µl

阳性对照引物各10 µM

阴性对照引物各20 µM

法律信息

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
CPG METHYLQUEST is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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