用途
sufficient for 192 tests
包装
kit of 1 (10 components)
制造商/商品名称
Roche
技术
ELISA: suitable
储存温度
2-8°C
一般描述
CAT ELISA 对 大肠埃希菌 （Tn9 编码）的 CAT（i 类型）（乙酰辅酶 a：氯霉素乙酰转移酶， EC 2.3.1.28） 具有特异性。
在转染的真核细胞中启动子活性的研究一般是通过将启动子序列连接到一个编码易于检测的“报告基因”蛋白的基因上，如氯霉素乙酰转移酶 (CAT)、β-半乳糖苷酶（β-Gal），或荧光素酶 (Luc)。
细菌酶氯霉素乙酰转移酶（CAT，I 类型），由 Tn9 编码，没有真核等价物，已成为转染实验中使用的标准标记之一。传统上，CAT 活性使用放射性同位素 CAT 测定。
细菌酶氯霉素乙酰转移酶（CAT，I 类型），由 Tn9 编码，没有真核等价物，已成为转染实验中使用的标准标记之一。传统上，CAT 活性使用放射性同位素 CAT 测定。
应用
仅用于研究目的。不用于诊断程序。
CAT ELISA 用于定量测定转染了携带 CAT 编码报告基因的质粒的真核细胞中的 CAT 表达。
CAT ELISA 用于定量测定转染了携带 CAT 编码报告基因的质粒的真核细胞中的 CAT 表达。
生化/生理作用
CAT ELISA 基于夹心 ELISA 原理。裂解转染细胞后，将细胞提取物（含 CAT 酶）加入微孔板的孔中，微孔板预先包被 CAT 多克隆抗体（抗 CAT）。细胞提取物中包含的所有 CAT 均与结合在微孔板表面的抗 CAT 抗体结合。然后，加入地高辛标记的抗 CAT 抗体（抗 CAT-DIG），并与 CAT 结合。下一步，加入与过氧化物酶结合的地高辛抗体（抗-DIG-POD），并与地高辛结合。最后一步，加入过氧化物酶底物 ABTS。过氧化物酶催化底物裂解，产生有色反应产物。使用 ELISA 酶标仪测定样品的吸光度，吸光度与细胞提取物中存在的 CAT 级别直接相关。使用底物增强剂的 ABTS 可增强检测的灵敏度。
特点和优势
CAT ELISA 对来自 大肠埃希菌 （Tn9 编码）的 CAT（i 类型）（乙酰辅酶 A：氯霉素乙酰转移酶，EC 2.3.1.28）具有特异性。
- 标准化： 允许直接比较不同组实验的数据（即使使用不同生产批次的试剂盒）
- 更快： 从开始到结束大约 4 小时
- 更安全： 未使用放射性同位素
- 更准确： 测量的是 CAT 蛋白合成的实际量，而不仅仅是 CAT 酶活性
- 灵敏度： 相当于放射性 CAT 测定的灵敏度
- 易于操作： 遵循微孔板中的标准 ELISA 方案；允许 Triton 裂解转染细胞（Triton 可快速抑制放射性同位素分析中的 CAT 活性）
- 更灵活：允许分析植物原生质体（GUS 检测的替代方法）和动物细胞中的启动子
包装
1 个试剂盒包含 10 种组分。
制备说明
工作液： CAT 酶工作稀释液
加 40μl CAT 酶贮备液（溶液 1）加 3.96 mL 样品缓冲液（溶液 7），得到 CAT 酶工作稀释液（最终浓度约为 1 ng/mL），足以得到一式两份校准曲线。
处理说明
储存条件（工作液）： 样品缓冲液 2 至 8°C
即用型样品缓冲液的稳定性：2 至 8°C 下 2 个月，否则分装于-15 至-25°C 下。
加 40μl CAT 酶贮备液（溶液 1）加 3.96 mL 样品缓冲液（溶液 7），得到 CAT 酶工作稀释液（最终浓度约为 1 ng/mL），足以得到一式两份校准曲线。
处理说明
- CAT 酶标准品稀释液应在使用前新鲜配制，不可存放。
- 按照下图表所述的 1:2 稀释步骤，在反应管中制备标准品系列稀释液。
- 为了得到校准曲线，我们推荐使用列出的 5 个浓度。
- 每孔需要 200μl 各稀释液。
- 为确保测量和校准曲线准确，我们建议每个浓度制备两份样品进行测量。
- 为避免较高浓度的溶液被夹带到较低浓度的样品中，各稀释步骤中使用新鲜的移液头。
- 各稀释液必须重复测量两次。
储存条件（工作液）： 样品缓冲液 2 至 8°C
即用型样品缓冲液的稳定性：2 至 8°C 下 2 个月，否则分装于-15 至-25°C 下。
其他说明
仅用于生命科学研究。不可用于诊断。
仅试剂盒组分
产品编号
说明
- CAT Enzyme (type I), from E. coli
- Anti-CAT-digoxigenin antibody
- Anti-Digoxigenin-POD antibody
- POD Substrate
- Substrate Enhancer
- Washing Buffer 10x concentrated
- Sample Buffer
- Lysis Buffer 5x concentrated
- Microplates, precoated with anti-CAT (2 x strip frame with 12 modules of 8 wells)
- Self-adhesive Plate Cover Foils (3)
查看所有结果 (10)
警示用语：
Danger
危险分类
Aquatic Chronic 3 - Carc. 1B - Eye Irrit. 2 - Muta. 1B - Skin Sens. 1
储存分类代码
6.1D - Non-combustible acute toxic Cat.3 / toxic hazardous materials or hazardous materials causing chronic effects
WGK
WGK 2
闪点(°F)
does not flash
闪点(°C)
does not flash
法规信息
监管及禁止进口产品
此项目有
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