生物来源
Clostridium histolyticum
质量水平
类型
Type I-A
表单
lyophilized powder
比活
≥125 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units)
0.5-5.0 FALGPA units/mg solid
分子量
68-130 kDa
浓度
1 mg/mL
技术
cell culture | mammalian: suitable
single cell analysis: suitable
pH值(酸碱度)
6.3-8.8
运输
ambient
储存温度
−20°C
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一般描述
胶原酶是一种蛋白酶,可切割三螺旋结构的蛋白,即胶原蛋白。组织胶原酶有三种类型,它们属于基质金属蛋白酶(MMP)家族。来自溶组织梭菌( Clostridium histolyticum )的胶原酶具有非常强的活性,它在低至4-10℃的温度下可从两端消化胶原蛋白。 粗制胶原酶混合物含有两种主要类型的酶,即胶原酶和梭菌蛋白酶。
应用
来自溶组织梭菌( Clostridium histolyticum )的胶原酶被用于以下应用:
本品适用于人类肿瘤、小鼠肾脏、人类成人和胎儿的脑、肺和许多其他上皮组织的解离。 它还被证明适用于肝脏和肾脏灌注研究、胰腺消化、非实质性大鼠肝细胞的分离、以及肝细胞制备。 胶原酶也已用于制备动脉组织,以对晚期糖基化终产物进行研究。 该酶用于(浓度约为1mg/ml)对肝细胞的释放进行检测。消化浓度范围为0.1至5mg/mL。
适用于制备用于测序的单细胞悬液。
- 足细胞分离
- 用于酶催化法的对比
- 用于免疫细胞化学的组织制备
- 睾丸精子提取
- 制备单细胞悬浮液
- 免疫荧光法
本品适用于人类肿瘤、小鼠肾脏、人类成人和胎儿的脑、肺和许多其他上皮组织的解离。 它还被证明适用于肝脏和肾脏灌注研究、胰腺消化、非实质性大鼠肝细胞的分离、以及肝细胞制备。 胶原酶也已用于制备动脉组织,以对晚期糖基化终产物进行研究。 该酶用于(浓度约为1mg/ml)对肝细胞的释放进行检测。消化浓度范围为0.1至5mg/mL。
适用于制备用于测序的单细胞悬液。
生化/生理作用
每摩尔胶原蛋白酶被4g原子钙活化。 它被乙二醇-双(β-氨基乙基醚)-N,NN′,N′-四乙酸,β-巯基乙醇、谷胱甘肽、巯基乙酸和8-羟基喹啉抑制。
胶原酶产品是一种由溶组织梭菌( C.histolyticum)分泌的酶的混合物,分泌酶中10-18种化合物成分的相对比例在不同产品中有所差异。 主要成分是两种胶原酶、梭菌蛋白酶和中性蛋白酶。 这些酶的协同作用可降解胶原蛋白和其他细胞内物质。胶原酶和中性蛋白酶的作用是细胞从组织有效释放所必需的。 各种类型的胶原蛋白是胶原酶的天然底物。
注意
本品在-20°C下可稳定保存一年。在37℃、50℃和-20℃下保存30天,其FALGPA或蛋白酶活性没有损失。粗制胶原酶溶液分装品( 10 mg/mL)经快速冷冻可保持稳定,并且可在-20℃下冷冻保存。进一步冻融循环会损坏溶液。 本品在冰上放置7小时,可保留100%活性。
单位定义
一个胶原蛋白消化单元(CDU)从牛跟腱胶原蛋白中释放的肽链量和1.0 μ亮氨酸,5小时,pH7.4,37℃,在钙离子存在下的茚三酮颜色相同。一个 FALGPA水解单元每分钟,25℃,水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一个中性蛋白酶单元水解酪蛋白,产生颜色和1.0 μmole 酪氨酸每5小时,pH7.5,37℃下产生的相同。一个梭菌蛋白酶单元在DTT存在下,pH7.6,25℃,每分钟水解1.0 μmole BAEE。
制备说明
该胶原酶来自溶组织梭菌(Clostridium histolyticum)的培养滤液。培养滤液被认为含有至少7种不同蛋白酶,分子量范围为68-130 kDa。本品为I-A型。其溶液通常使用TESCA缓冲液(含有50 mM TES,0.36 mM氯化钙,在37℃时pH 7.4)制备,浓度为1-2 mg/mL。
警示用语:
Danger
危险分类
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
靶器官
Respiratory system
储存分类代码
11 - Combustible Solids
WGK
WGK 1
闪点(°F)
Not applicable
闪点(°C)
Not applicable
个人防护装备
dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves
历史批次信息供参考:
分析证书(COA)
Lot/Batch Number
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