λ噬菌体DNA，甲基化 来源于大肠杆菌 宿主株 W3110

噬菌体 DNA 从受感染的大肠杆菌中分离出来，经过一系列酶促步骤，然后进行最终的苯酚-氯仿提取。 这种甲基化的 lambda DNA 被 Bcl I、Cla I、Mbo I、Mbo II、Taq I 和 Xba I 部分切割。

来自大肠杆菌宿主菌株 W3110 的甲基化 Lambda 噬菌体 DNA 已用于 DNA 组合以确定转化因子。

λ 噬菌体有一个二十面体头和一个长尾，末端为单根纤维。在 5′ 末端的两端是互补的 12 个核苷酸的单链序列，它们有助于 DNA 的粘性末端（cos 区）。噬菌体的尾部锁定在宿主外膜受体上，并将噬菌体 DNA 注入细胞。噬菌体将大肠杆菌转化为溶原性状态，其中噬菌体功能受到抑制，并且噬菌体基因组可能长时间保持休眠（原噬菌体）。这种特性在携带负责 CI 表达的 CII 和 CIII 基因的噬菌体中可见。CI 基因中具有 CI 突变的噬菌体能够在规定的温度下保持溶原状态。
用 λ C1857 菌株感染大肠杆菌菌株 W3110 会产生大肠杆菌溶原菌培养物。通过用 pH 8.0 的高盐缓冲液裂解，噬菌体从大肠杆菌细胞沉淀中释放出来。 将粗混合物通过一系列酶促步骤、多个铯梯度，然后用 1 mM Tris-HCl、pH 8.0 和 1 mM 氯化镁对噬菌体 DNA 进行透析。最后用苯酚-氯仿溶液提取 DNA。

来自大肠杆菌宿主菌株 W3110 的甲基化 Lambda 噬菌体 DNA 适合用作限制性内切酶的底物。它用于 ChIP 测定中的免疫沉淀。

独特的限制位点：Apa I、Nae I、Nar I、Nhe I、PaeR7 I、SnaB I、Xba I 和 Xho I。甲基化 lambda 被 Bcl I、Cla I、Mbo I、Mbo II、Taq I 和 Xba I 部分切割。

向小瓶中加入适量的 1x Tris-EDTA 缓冲液，pH 8.0（货号 T9285，稀释至 1x 或相当）。
将 DNA 样品瓶在 65°C 下孵育 4 小时，并频繁混合。
复溶后，产品应储存于 -20°C。

一外径（A₂₆₀） 是大约 50 μg DNA