Merck
CN

SRE0047

Sigma-Aldrich

蛋白酶 K 来源于林伯氏白色念球菌

Suitable for manufacturing of diagnostic kits and reagents, lyophilized powder, ≥30 units/mg protein, for molecular biology

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别名:
肽链内切酶
CAS号:
EC 号:
MDL编号:
NACRES:
NA.54

生物来源

fungus (Tritirachium album)

质量水平

等级

for molecular biology

形式

lyophilized powder

比活

≥30 units/mg protein

分子量

28.93 kDa

杂质

≤1 ppm DNA

应用

diagnostic assay manufacturing

异质活性

DNAse, Nickase and RNAse, none detected

运输

wet ice

储存温度

−20°C

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一般描述

蛋白酶 K 是一种细胞外内肽酶,模具 Tritirachium album Limber 合成。蛋白酶 K 属于枯草杆菌蛋白酶的一个新亚家族。是由 277 个氨基酸组成的蛋白质,分子量为 28,930Da。活性蛋白酶 K 的特征是具有未水解的蛋白链和自溶的多肽链。

应用

在分离DNA和RNA的过程中,用于核酸酶的蛋白水解失活。
用于去除内毒素结合的阳离子蛋白,如溶菌酶和核糖核酸酶A。
据报道,其可用于分离肝、酵母和绿豆线粒体
用于测定酶在细胞膜上的定位
用于石蜡包埋组织切片的处理,暴露用于抗体标记的抗原结合位点。
用于可传播海绵状脑病(TSE)研究中朊病毒脑组织样本蛋白的消化。
蛋白酶 K 催化角蛋白的水解。

生化/生理作用

蛋白酶 K 催化角蛋白的水解。
蛋白酶K是一种稳定且具有高活性的丝氨酸蛋白酶。晶体和分子结构研究证据表明该酶属于枯草素家族,具有活性位点催化三联体(Asp39-His69-Ser224)。它在一系列广泛的环境中均稳定:pH,缓冲盐,去污剂(SDS)以及温度。 在0.1-0.5% SDS存在的情况下,蛋白酶K可保持活性,在不损害分离DNA完整性的前提下,可以消化DNA制剂中的多种蛋白质和核酸酶。

单位定义

在pH 7.5,37 °C 条件下,一单位的酶每分钟将会尿素变性的血红蛋白以产生与1.0 μmol (181μg) 酪氨酸等同的颜色(Folin-Ciocalteu试剂提供的颜色)。

象形图

Exclamation markHealth hazard

警示用语:

Danger

危险分类

Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

靶器官

Respiratory system

储存分类代码

11 - Combustible Solids

WGK

WGK 1

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Not applicable

闪点(°C)

Not applicable

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Proteinase K from Tritirachium album Limber
Ebeling W, et al.
FEBS Journal, 47(1), 91-97 (1974)
Marin Volarić et al.
Genes, 12(8) (2021-08-28)
The long-read Nanopore sequencing has been recently applied for assembly of complex genomes and analysis of linear genome organization. The most critical factor for successful long-read sequencing is extraction of high molecular weight (HMW) DNA of sufficient purity and quantity.
Amino acid sequence of proteinase K from the mold Tritirachium album Limber: Proteinase K ? a subtilisin-related enzyme with disulfide bonds.
Jany KD, et al.
Febs Letters, 199(2), 139-144 (1986)
Proteinase K from Tritirachium album Limber.
W Ebeling et al.
European journal of biochemistry, 47(1), 91-97 (1974-08-15)

商品

Proteinase K is commonly used in molecular biology and biochemistry applications to digest structural proteins and enzymes. It is useful in removing nucleases that can degrade DNA and RNA, as well as in the isolation of intact genomic DNA from various sources.

The use of Pro K in combination with other reagents, such as detergents and chaotropic agents, can help to disrupt the cell membranes and release DNA from tissue. This is particularly important for downstream applications such as PCR, sequencing, and other molecular biology techniques that require pure and intact DNA.

In blood DNA extraction, Proteinase K, an enzyme commonly used to degrade proteins, can help break down the cellular and nuclear membranes, releasing DNA from the cells that protect it from degradation and increase purity/yield making it more suitable for various molecular biology techniques.

The cost of proteinase K can vary depending on the source, purity, manufacturing process and vendor’s quality management system. It is important to balance the cost with the desired quality, performance, documentation and technical/quality support to select the optimal Proteinase K for the intended application

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