牛奶中的过氧化物酶含量测定
特定底物转化后的目测测定
加热处理对食用牛奶的品质和卫生有着至关重要的影响。加热处理的主要目的时消灭病原微生物和引起食物腐败的物质。不过，这类处理也会导致牛奶成分改变，比如牛奶中的固有酶失活。因此，加热条件必须满足如下设定：最终产品保持所需的性能，同时不会产生不期望的副作用。
德国联邦牛奶法规中规定了生产不同类型牛奶所需的温度/时间范围1。
公认的热处理方法有巴氏杀菌、超高温处理（UHT）和灭菌。巴氏杀菌的进一步区分标准有长时间加热、短时间加热和超高温加热。
热处理牛奶的质量控制和检测的方法，特别利用了牛奶中固有酶会随温度变化而失活的特性。2.牛奶中固有的过氧化酶（乳过氧化酶）的检测可用于评估正确的高温加热，而碱性磷酸酶的检测被用于监测长时间加热或短时间加热是否充分。因此，在短时间加热处理的牛奶中，原始碱性磷酸酶活性必须为负，乳过氧化酶活性必须为正；而在长时间加热的处理的牛奶中，这两种酶都必须失活。”3
MQuant® 过氧化物酶试纸条是检测牛奶中过氧化物酶的简单而准确的方法。
以下应用说明描述了使用 MQuant® 过氧化物酶试纸条测定牛奶中过氧化物酶活性。
使用 MQuant® 过氧化物酶测试测量牛奶中过氧化物酶的实验条件
方法
在过氧化物酶催化作用下，有机氧化还原指示剂会转化为蓝色化合物。将试纸条反应区与色标区目测对比，可判断过氧化物酶有活性(+, ++) 或失活 (-)。
样品材料
牛奶
测定范围
有-/无-结果
(+)-色域对应过氧化物酶活性 >12 U/l， (++)-色域代表过氧化物酶活性 >100 U/l。通常，反应区变蓝代表过氧化物酶有活性。
试剂和配件
试剂
货号117828 MQuant® 过氧化物酶测试盒，试纸条比色法
配件
用于测量环境温度的块加热器或水浴（23 °C）或温度计
鉴定牛奶中过氧化氢酶的分析方法
样品制备：
无需样品制备。
测量：
请按照如下步骤进行分析：
用上述检测试剂盒进行测定。
- 使用注射器将 1 ml 样品 (20–25 °C) 注入测试瓶。
- 使用移液管加入4 ml蒸馏水（20-25 °C）并混合。
- 加入 5 滴试剂 POD-1 并旋转。添加试剂时，垂直握住瓶身。
- 将试纸条的反应区浸入样品中1秒。
- 立即让多余的液体通过试纸条的长边缘流到用于吸收的纸巾上，1分钟中后确定反应区的颜色与标签上哪个颜色最一致。
- 读取结果(请参考 MQuant® 过氧化物酶测测试盒包装内页说明)。
- 将试纸条反应区与色标区目测对比，可判断过氧化物酶有活性(+, ++) 或失活 (-)。
色域仅作为粗略判断。通常，反应区变蓝代表过氧化物酶有活性。请注意，反应区的颜色在规定的反应时间结束后还会持续变化。此时颜色不能代表测试结果。
结果
MQuant® 过氧化物酶测试盒与 DIN 反射法 10483-2的效果对比:
通过 DIN 反射法测试盒 10483-2作为分析参考，验证测定值。结果如下表所示。
ESL=延长保质期
结论
对比测量结果表明，结果与反射测量 DIN 方法结果一致。
MQuant® 过氧化物酶试纸条是检测牛奶中过氧化物酶的快速且简单的方法。使用试纸条可以控制加热处理的有效性，这是保存牛奶和消除病原微生物所必需的。
参考文献
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