生物来源
mouse
质量水平
抗体形式
purified immunoglobulin
抗体产品类型
primary antibodies
克隆
21A7, monoclonal
种属反应性
human
种属反应性(根据同源性预测)
nonhuman primates (based on 100% sequence homology), Xenopus (based on 100% sequence homology), bovine (based on 100% sequence homology), mouse (based on 100% sequence homology), rat (based on 100% sequence homology)
技术
ChIP: suitable (ChIP-seq)
ELISA: suitable
western blot: suitable
同位素/亚型
IgG2bκ
NCBI登记号
UniProt登记号
运输
ambient
靶向翻译后修饰
acetylation (Lys105/Lys106)
基因信息
human ... SMC3(9126)
一般描述
染色体蛋白3(UniProt Q9UQE7;也称为Bamacan、基底膜相关软骨素蛋白聚糖、硫酸软骨素蛋白聚糖6、染色体相关多肽、hCAP、SMC蛋白3、SMC-3)的结构维持由人的SMC3(也称为BAM、BMH、CDLS3、CSPG6、SMC3L1)基因(基因ID 9126)编码。粘合素是由Rad21和两个染色体蛋白SMC1和SMC3的结构维持组成的核三方复合物。黏连蛋白在姐妹染色单体粘附以及DNA修复和基因表达调控中起重要作用。为了在S期建立姐妹染色单体的内聚力,SMC3被两个黏连蛋白乙酰基转移酶(CoATs)ESCO1和ESCO2乙酰化(在人的K105和K106上),它们的N末端结构域和在发育过程中以及整个细胞周期中的表达不同。ChIP-seq分析显示,黏连蛋白将ESCO1募集到黏连蛋白和CTCF占据的11,000多个染色质位点,这些位点介导远程染色质相互作用并在整体上调节转录。另一方面,ESCO2很少在REST/NRSF(RE1沉默转录因子/神经元限制性沉默因子)靶向的位点富集,该位点抑制神经元特异性基因的转录。SMC3乙酰化被认为在S期诱导二聚体铰链结构的构象变化,并允许二聚体打开和DNA加载。
观测分子量〜160 kDa。计算分子量142.0/141.5/141.6/138.4/140.7 kDa(牛/人/小鼠/大鼠/非洲爪蟾)。在某些裂解物中可以观察到未鉴定的条带。
特异性
克隆21A7结合Lys105/106-二乙酰化SMC3肽的亲和力比Lys105-单乙酰化SMC3肽高2倍(Kd分别为0.04和0.09 µg/mL),同时对Lys105-单乙酰化(Kd=0.73 µg/mL)的亲和力大大降低,对非乙酰化(Kd=2.99 µg/mL)肽的亲和力很小(Rahman, S., et al. (2015).Proc.Natl.Acad.Sci. U. S. A. 112(36):11270-11275)。
免疫原
KLH偶联的线性肽,对应于含有乙酰化Lys105和Lys106的人/小鼠/大鼠SMC3的靶区域序列。
应用
ELISA分析:代表性批次结合Lys105/106-二乙酰化SMC3肽的亲和力比Lys105-单乙酰化SMC3肽高2倍(Kd分别为0.04和0.09 µg/mL),同时对Lys105-单乙酰化(Kd=0.73 µg/mL)的亲和力大大降低,对非乙酰化(Kd=2.99 µg/mL)肽的亲和力很小(Rahman, S., et al. (2015).Proc.Natl.Acad.Sci. U. S. A. 112(36):11270-11275)。
染色质免疫沉淀(ChIP)分析:与野生型HCT-116细胞相比,代表性批次检测到HDAC8-null HCT116细胞中靶染色质位点的SMC3占有率增强(Rahman,S.,et al.(2015).Proc.Natl.Acad.Sci. U. S. A. 112(36):11270-11275)。
ChIP-seq分析:代表性批次通过ChIP-seq检测到SMC3 11号染色体富集位点,包括81%的Rad21靶位点和70%的Esco1靶位点(Rahman,S.,et al.(2015).Proc.Natl.Acad.Sci. U. S. A. 112(36):11270-11275)。
蛋白质印迹分析:一个代表性批次在HeLa细胞中检测到SMC3 Lys105/106乙酰化。通过shRNA处理的ESCO1或ESCO2消耗降低了SMC3 Lys105/106乙酰化水平,而双重ESCO1/2消耗导致极大的SMC3 Lys105/106乙酰化降低(Rahman,S.,et al.(2015).Proc.Natl.Acad.Sci. U. S. A. 112(36):11270-11275)。
染色质免疫沉淀(ChIP)分析:与野生型HCT-116细胞相比,代表性批次检测到HDAC8-null HCT116细胞中靶染色质位点的SMC3占有率增强(Rahman,S.,et al.(2015).Proc.Natl.Acad.Sci. U. S. A. 112(36):11270-11275)。
ChIP-seq分析:代表性批次通过ChIP-seq检测到SMC3 11号染色体富集位点,包括81%的Rad21靶位点和70%的Esco1靶位点(Rahman,S.,et al.(2015).Proc.Natl.Acad.Sci. U. S. A. 112(36):11270-11275)。
蛋白质印迹分析:一个代表性批次在HeLa细胞中检测到SMC3 Lys105/106乙酰化。通过shRNA处理的ESCO1或ESCO2消耗降低了SMC3 Lys105/106乙酰化水平,而双重ESCO1/2消耗导致极大的SMC3 Lys105/106乙酰化降低(Rahman,S.,et al.(2015).Proc.Natl.Acad.Sci. U. S. A. 112(36):11270-11275)。
抗乙酰SMC3(Lys105/106),克隆21A7,目录号MABE1073是一种高度特异性的小鼠单克隆抗体,靶向SMC3 Lys105/106乙酰化,并已在染色质免疫沉淀(ChIP)、ChIP-seq、ELISA和蛋白质印迹中进行了检验。
研究类别
表观遗传学&核功能
表观遗传学&核功能
外形
形式:纯化
纯化的小鼠IgG2b,溶于含0.1 M Tris-甘氨酸(pH 7.4)、150 mM NaCl和0.05%叠氮化钠的缓冲液中。
纯化蛋白G。
制备说明
自接收之日起,在2-8°C下可稳定保存1年。
分析说明
通过蛋白质印迹法在人视网膜上皮色素(REP)细胞中进行评估。
蛋白质印迹分析:与野生型REP细胞的裂解物相比,该抗体以1:1,000稀释度在10 µg N-乙酰基转移酶ESCO1敲除人视网膜上皮色素(REP)细胞的裂解物中检测到SMC3 Lys105/106乙酰化降低。
蛋白质印迹分析:与野生型REP细胞的裂解物相比,该抗体以1:1,000稀释度在10 µg N-乙酰基转移酶ESCO1敲除人视网膜上皮色素(REP)细胞的裂解物中检测到SMC3 Lys105/106乙酰化降低。
其他说明
浓度:请参考特定批次的数据表。
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12 - Non Combustible Liquids
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