技术
cell culture | stem cell: suitable
flow cytometry: suitable
质量水平
荧光
λex 488 nm
λex 532 nm
λem 615 nm
检测方法
fluorometric
运输
wet ice
一般描述
AldeRed ALDH检测试剂盒为癌症和干细胞科学家提供了活细胞分离和表征的新能力。AldeRed试剂是醛脱氢酶(ALDH)的红移荧光底物,可通过流式细胞术鉴定和分离细胞,同时使用绿色荧光细胞系、抗体、转基因动物和报告基因检测。
在《自然通讯》中了解更多有关AldeRed的信息!(立刻了解!)
高ALDH活性是正常和恶性干细胞的通用标志物。可以基于ALDH的酶活性来鉴定和分离细胞,ALDH是一种负责氧化有害醛副产物的解毒酶。标志物ALDH已被用于从各种人类恶性肿瘤分离癌症干细胞,包括膀胱、乳腺、宫颈、结肠、头颈部、肝、肺、胰腺、前列腺和卵巢。AldeRed测定法使用荧光且无毒的ALDH底物(AldeRed 588-A),该底物可自由扩散到完整和有活力的细胞中,但一旦被ALDH转化为相应的酸,则仍被留在细胞内。产生的荧光量与细胞中的ALDH活性成正比,并通过流式细胞术进行测量,从而可以进行荧光激活细胞分选(FACS)。该试剂盒提供ALDH抑制剂二乙氨基苯甲醛(DEAB),用于背景荧光评估所需的阴性对照检测。
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高ALDH活性是正常和恶性干细胞的通用标志物。可以基于ALDH的酶活性来鉴定和分离细胞,ALDH是一种负责氧化有害醛副产物的解毒酶。标志物ALDH已被用于从各种人类恶性肿瘤分离癌症干细胞,包括膀胱、乳腺、宫颈、结肠、头颈部、肝、肺、胰腺、前列腺和卵巢。AldeRed测定法使用荧光且无毒的ALDH底物(AldeRed 588-A),该底物可自由扩散到完整和有活力的细胞中,但一旦被ALDH转化为相应的酸,则仍被留在细胞内。产生的荧光量与细胞中的ALDH活性成正比,并通过流式细胞术进行测量,从而可以进行荧光激活细胞分选(FACS)。该试剂盒提供ALDH抑制剂二乙氨基苯甲醛(DEAB),用于背景荧光评估所需的阴性对照检测。
应用
• 为了获得AldeRed 588-A的最佳激发和发射,请将蓝色激光(488 nm)或绿色激光(532 nm)与PE-Texas Red检测器(615 nm)结合使用。 在近端测量通道(例如PE)中进行检测也是可能的,但可能会影响测试样品和DEAB处理的对照样品之间的ΔMFI(平均荧光强度)。
•暴露于活化的AldeRed 588-A后,所有活的完整细胞(即使ALDH表达低)也会发荧光。对于每个细胞样品,必须生成DEAB处理的对照以建立基线荧光。
•使用无菌技术处理所有试剂。
•暴露于活化的AldeRed 588-A后,所有活的完整细胞(即使ALDH表达低)也会发荧光。对于每个细胞样品,必须生成DEAB处理的对照以建立基线荧光。
•使用无菌技术处理所有试剂。
研究类别
干细胞研究
细胞凋亡 & 癌症
干细胞研究
细胞凋亡 & 癌症
组分
1.AldeRed 试剂:(部件号CS216596)。 一(1)瓶含有50µg AldeRed 试剂粉末。
2.DEAB试剂:(部件号CS216595)。一(1)瓶含有1 mL DEAB(二乙氨基苯甲醛)试剂。
3.盐酸(2N):(部件号CS216594)。 一(1)瓶含有1.5 mL的2标准盐酸。
4.二甲基亚砜:(部件号CS216593)。 一(1)瓶含有1.5 mL的二甲基亚砜(DMSO)。
5.AldeRed 检测缓冲液:(部件号CS216592)。 四(4)瓶,每瓶含有25 mL AldeRed检测缓冲液。
6.维拉帕米: (部件号CS220012)。 四(4)瓶,每瓶含有615 µg维拉帕米粉末。
2.DEAB试剂:(部件号CS216595)。一(1)瓶含有1 mL DEAB(二乙氨基苯甲醛)试剂。
3.盐酸(2N):(部件号CS216594)。 一(1)瓶含有1.5 mL的2标准盐酸。
4.二甲基亚砜:(部件号CS216593)。 一(1)瓶含有1.5 mL的二甲基亚砜(DMSO)。
5.AldeRed 检测缓冲液:(部件号CS216592)。 四(4)瓶,每瓶含有25 mL AldeRed检测缓冲液。
6.维拉帕米: (部件号CS220012)。 四(4)瓶,每瓶含有615 µg维拉帕米粉末。
质量
• 通过流式细胞术测量SK-BR-3细胞中的ALDH活性来测试每个批次。
• AldeRed® 试剂纯度为95%(PMR)
• AldeRed® 试剂纯度为95%(PMR)
储存及稳定性
• 试剂盒保存于2-8°C。
• 复溶和活化的AldeRed试剂可以在-20°C下以等分试样避光保存长达1年。不建议反复冻融。
•补充有维拉帕米的AldeRed分析缓冲液可以在2-8°C下以等分试样保存长达3个月。
• 复溶和活化的AldeRed试剂可以在-20°C下以等分试样避光保存长达1年。不建议反复冻融。
•补充有维拉帕米的AldeRed分析缓冲液可以在2-8°C下以等分试样保存长达3个月。
法律信息
ALDERED is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
免责声明
除非我们的产品目录或产品附带的其他公司文档另有说明,否则我们的产品仅供研究使用,不得用于任何其他目的,包括但不限于未经授权的商业用途、体外诊断用途、离体或体内治疗用途或任何类型的消费或应用于人类或动物。
警示用语:
Danger
危险分类
Acute Tox. 3 Oral - Aquatic Chronic 2 - Eye Irrit. 2 - Flam. Liq. 2 - Met. Corr. 1
储存分类代码
3 - Flammable liquids
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55.4 °F
闪点(°C)
13 °C
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