制造商/商品名称
Roche
储存条件
avoid repeated freeze/thaw cycles
一般描述
DNA片段化成像试剂盒是一种简单快速的TUNEL检测试剂盒,用于检测哺乳动物细胞的凋亡诱导因素。DNA片段化可通过末端脱氧核苷酸转移酶和荧光素标记的dUTP检测,并可通过荧光显微镜或自动成像平台(如Cellavista系统)进行测定。该试剂盒使用染料染色活细胞和死细胞的细胞核,从而定量细胞总数和凋亡细胞数量,并计算凋亡细胞的百分比。
应用
程序性细胞死亡(凋亡)是哺乳动物细胞在组织稳态过程中的一个重要通路。细胞死亡功能障碍与病理有关。半胱天冬酶诱导的DNA片段的定量是检测凋亡诱导的主要技术之一。DNA片段化成像试剂盒采用TUNEL法,利用末端脱氧核苷酸转移酶和荧光素标记的dUTP进行准确、快速的荧光定量检测。该试剂盒是通过中高通量细胞工作流程测量培养基中细胞凋亡情况的理想工具。
- 快速测定细胞工作流程中的凋亡诱导因素,适用于生命科学研究。
- 能在产品开发阶段可靠地进行筛选检测,例如癌症研究、临床前安全性检验。
- 准确检测癌症研究中的恶性细胞敏感性。
生化/生理作用
凋亡细胞的标记
细胞凋亡中的基因组DNA剪切产生双链、低分子量DNA片段(单和寡核苷酸)以及高分子量DNA中的单链断裂(缺口)。通过一种名为TUNEL反应的酶分析方法,可采用修饰核苷酸标记游离3′-OH端基,从而鉴定出这些DNA链断裂。TUNEL反应优先标记凋亡过程中产生的DNA链断裂。TUNEL法可以区分细胞凋亡和坏死,以及细胞药物或辐射引起的原发性DNA链断裂。DNA片段化成像试剂盒使用末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)标记DNA链断裂。TdT采用TUNEL反应以非模板依赖性方式,催化标记的核苷酸聚合为游离的 3′-OH DNA末端。掺入核苷酸聚合物的荧光素可通过荧光显微镜进行检测和定量。
核染色
Hoechst 33342是一种能与DNA结合的细胞透过性染色剂。它常用来对活细胞和死细胞进行染色。
细胞凋亡中的基因组DNA剪切产生双链、低分子量DNA片段(单和寡核苷酸)以及高分子量DNA中的单链断裂(缺口)。通过一种名为TUNEL反应的酶分析方法,可采用修饰核苷酸标记游离3′-OH端基,从而鉴定出这些DNA链断裂。TUNEL反应优先标记凋亡过程中产生的DNA链断裂。TUNEL法可以区分细胞凋亡和坏死,以及细胞药物或辐射引起的原发性DNA链断裂。DNA片段化成像试剂盒使用末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)标记DNA链断裂。TdT采用TUNEL反应以非模板依赖性方式,催化标记的核苷酸聚合为游离的 3′-OH DNA末端。掺入核苷酸聚合物的荧光素可通过荧光显微镜进行检测和定量。
核染色
Hoechst 33342是一种能与DNA结合的细胞透过性染色剂。它常用来对活细胞和死细胞进行染色。
特点和优势
- 使用Roche′s Cellavista系统优化数据评估。应用该系统的自动成像功能获得可重现性结果。
- 节省时间和资源:一个96孔板的总检测时间(包括分析时间在内)一共为85分钟。
- 在改良方案中,清洗步骤减少有助于降低细胞损失风险。
包装
1个试剂盒包含3种组分
制备说明
15至25°C储存。(避光。干燥黑暗环境储存。)
储存条件(工作溶液):在试验操作流程第6步通过混合酶溶液和标记溶液(管2和管3)制备的溶液不能储存。该反应液应现配现用。未使用的反应液应丢弃。
分析说明
该试剂盒使用细胞模型(经抗霉素A处理的HeLa细胞)进行功能测试。
其他说明
仅用于生命科学研究。不可用于诊断。
仅试剂盒组分
产品编号
说明
- Nuclei Dye (blue cap), for fluorimetric determination of cell count based on labeling of cell nuclei
- Enzyme Solution (yellow cap), for labelling of free 3′-OH termini of DNA fragements with fluorescein dUTP
- Label Solution (clear cap), containing a nucleotid mix with fluorescein dUTP in reaction buffer
警示用语:
Danger
危险分类
Aquatic Chronic 2 - Carc. 1B - Muta. 2 Inhalation
储存分类代码
6.1D - Non-combustible, acute toxic Cat.3 / toxic hazardous materials or hazardous materials causing chronic effects
WGK
WGK 3
闪点(°C)
does not flash
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