高纯质粒分离试剂盒

中低通量，小规模，质粒分离。

High Pure Plasmid Isolation Kit 使用碱裂解法（一种从 大肠杆菌中产生高纯度质粒 DNA 的常用方法 ，无 RNA 污染）少量分离纯化质粒 DNA。

在离液盐（盐酸胍）存在下，核酸结合到玻璃纤维织物的表面。这使得高纯度过滤器管能够在核酸（DNA 和 RNA）清除污染物的同时特异性地固定它们。

容量： 高纯自旋过滤管容量高达 700μL 样品体积。
样品： 0.5-4.0 mL 大肠埃希菌培养物（收获时密度为 1.5-5.0 a ₆₀₀ 单位/mL）

高纯质粒分离试剂盒制备达 15μg 来自细菌培养物的纯化质粒 DNA， 可直接用于大多数分子生物学应用：

• PCR
• 测序
• 克隆
• 体外转录
• 限制性内切酶消化
• 随机引物标记

试剂盒依靠碱裂解从细菌中释放质粒 DNA。RNase 去除裂解液中的所有 RNA。通过离心除去细胞碎片和（包埋）基因组 DNA 后，将剩余的上清液与离液盐混合，并应用于高纯度自旋过滤管中的玻璃纤维羊毛。在程序中使用的缓冲液条件下，质粒与玻璃纤维羊毛结合，而污染物质（盐、蛋白质和其他细胞污染物）不与之结合。简单的洗涤和离心步骤即可去除这些污染物。纯化后，质粒可以很容易地在小体积的低盐缓冲液或水中洗脱。

质粒 pUC19（4.5μg）从 1.5 mL 大肠埃希菌 JM ₈₃ 混悬液中纯化，其在含氨苄西林的 LB 培养基中生长 16 小时，细胞密度为 5 a ₆₀₀ 单位/mL。1 μg 纯化的质粒 DNA 在 + 37℃ 下用 5 U 限制性内切酶 Eco RI 孵育 1 小时，然后通过琼脂糖凝胶电泳进行分析。提取的质粒 DNA 与 CsCl 密度梯度离心法提取的质粒 DNA 对限制性内切酶酶切同样敏感。

仅用于生命科学研究。不可用于诊断。