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关于此项目
NACRES:
NA.85
UNSPSC Code:
12352200
Promoter:
Promoter name: TEF1
Promoter activity: constitutive
Promoter type: yeast
Promoter activity: constitutive
Promoter type: yeast
Origin of replication:
2Micron, pUC (500 copies)
Bacteria selection:
kanamycin
Reporter gene:
none
Peptide cleavage:
no cleavage
form
buffered aqueous solution
mol wt
size 7057 bp
bacteria selection
kanamycin
origin of replication
2Micron, pUC (500 copies)
peptide cleavage
no cleavage
promoter
Promoter name: TEF1
Promoter activity: constitutive
Promoter type: yeast
reporter gene
none
shipped in
ambient
storage temp.
−20°C
General description
PSF-TEFI-TPI1-PURO-嘌呤霉素选择酵母质粒是具有嘌呤霉素抗性的酿酒酵母表达载体。该质粒载体允许使用强组成型 TEF1 启动子表达转基因。载体还包含嘌呤霉素的抗性标记,允许含有质粒的细胞的生长和选择。抗性由组成型 TPI1 酵母启动子驱动。
启动子表达水平:该质粒包含酵母翻译延伸因子 1 启动子。它是我们提供的在酿酒酵母中表达最强的启动子。它还包含强大的酵母组成型磷酸三糖异构酶(TPI1)基因启动子,以驱动抗生素抗性基因。TPI 启动子表现出与翻译延伸因子 1 启动子(TEF-1)类似的表达水平。
启动子表达水平:该质粒包含酵母翻译延伸因子 1 启动子。它是我们提供的在酿酒酵母中表达最强的启动子。它还包含强大的酵母组成型磷酸三糖异构酶(TPI1)基因启动子,以驱动抗生素抗性基因。TPI 启动子表现出与翻译延伸因子 1 启动子(TEF-1)类似的表达水平。
Application
基因克隆:PSF-TEFI-TPI1-PURO-嘌呤霉素选择酵母质粒经设计可与多种克隆技术兼容。多重克隆位点包含一系列标准的常用限制性酶切位点。通过标准的克隆方法,基因可利用使用这些位点通过 DNA 连接酶而被插入。其他方法如连接酶非依赖性克隆(LIC)Gibson Assembly InFusionHD 或 Seamless GeneArt,也因与我们所有的质粒都基于相同的骨架而可以使用相同的方法被克隆到我们所有的目录载体中。
多克隆位点注释:MCS 中有一些重要位点。这些包括 NcoI 位点、XbaI 位点以及 BsgI 和 BseRI 位点。NcoI 位点包含一个起始密码子,该密码子紧邻 Kozak 和 Shine-Dalgarno 核糖体结合位点,位于其下游。当起始密码子处在该位置时,基因定位最佳。如果这不是必需的,并且您希望使用下游位点进行基因克隆,则可以通过用 KpnI 切割质粒来去除 NcoI 位点。
XbaI 位点包含一个终止密码子。该终止密码子处于与 BsgI 和 BseRI 位点相邻的特定位置,位于其下游。当 BseRI 或 BsgI 切割质粒时,它们会在 XbaI 位点的终止密码子处产生 TA 突出端,与我们用相同位点切割的所有肽标签质粒均相容。BseRI 和 BsgI 位点是非回文的,可从其结合位点切割一定数目的碱基。
每当我们将基因克隆到我们的多克隆位点时,我们总是将起始密码子和终止密码子定位在 MCS 中的相同位置。如果基因的起始和末端与 NcoI 和 XbaI 不兼容,我们将序列扩展到最近的外部位点,但保持起始和终止密码子位置一致。
多克隆位点注释:MCS 中有一些重要位点。这些包括 NcoI 位点、XbaI 位点以及 BsgI 和 BseRI 位点。NcoI 位点包含一个起始密码子,该密码子紧邻 Kozak 和 Shine-Dalgarno 核糖体结合位点,位于其下游。当起始密码子处在该位置时,基因定位最佳。如果这不是必需的,并且您希望使用下游位点进行基因克隆,则可以通过用 KpnI 切割质粒来去除 NcoI 位点。
XbaI 位点包含一个终止密码子。该终止密码子处于与 BsgI 和 BseRI 位点相邻的特定位置,位于其下游。当 BseRI 或 BsgI 切割质粒时,它们会在 XbaI 位点的终止密码子处产生 TA 突出端,与我们用相同位点切割的所有肽标签质粒均相容。BseRI 和 BsgI 位点是非回文的,可从其结合位点切割一定数目的碱基。
每当我们将基因克隆到我们的多克隆位点时,我们总是将起始密码子和终止密码子定位在 MCS 中的相同位置。如果基因的起始和末端与 NcoI 和 XbaI 不兼容,我们将序列扩展到最近的外部位点,但保持起始和终止密码子位置一致。
Analysis Note
欲查看本品的分析证书,请访问 www.oxgene.com
Other Notes
如需查看本品的序列信息,请访问产品页面
存储类别
12 - Non Combustible Liquids
闪点 (F)
Not applicable
闪点 (°C)
Not applicable