qPCR_实时定量PCR-默克生命科学

定量实时聚合酶链反应（qPCR）利用荧光报告分子对扩增产物进行定量。与常规PCR一样，该方法对DNA、cDNA或RNA模板进行扩增，但在每个循环中都会监测荧光信号，以进行相对或绝对定量。

该技术可广泛应用于多个研究领域，包括基因表达分析、基因分型、微RNA分析、基因变异分析以及蛋白质分析。

精选分类

聚合酶链式反应（PCR）是分子生物学实验室中的核心技术。PCR 可将 DNA 扩增几个数量级，我们的试剂和资源适用于多种研究工作流程，包括基因表达分析、基因分型、测序以及诱变应用等需求。

用于从昆虫、细菌和哺乳动物蛋白表达载体中实现可靠克隆和稳定蛋白表达的分子克隆与蛋白表达方法及操作规程。

用于研究RNA种类、DNA甲基化、染色质修饰和组蛋白修饰的表观遗传学试剂和资源。

全面的肠道微生物组分析：提供涵盖样本制备、测序、生物信息学和统计分析的整体解决方案。从16S到全基因组测序（WGS）。

通过测量并定量报告分子的荧光信号；这些报告分子通常是能够插入双链DNA碱基之间的染料（如SYBR® Green、溴化乙锭），或是专门设计用于与DNA上特定序列结合的探针（如分子信标、TaqMan®探针）。

qPCR 数据主要有两种定量方法。相对定量是更常见的方法，它利用 ΔΔCt 信息，通过与对照基因比较，确定样本中目标基因的表达量或丰度比，并以参考基因的表达比进行归一化。由于目标基因和参考基因的效率 E 值不同，该方法还会考虑 E 值之间的差异。这种方法在基因表达分析中更为常用。

第二种方法——绝对定量，在环境微生物学中更为常见，它利用标准曲线（SC）进行分析。 SC方法使用已知模板浓度N0的稀释系列，通过log(N0)与CT（阈值循环数）的线性回归绘制标准曲线。随后利用该曲线计算样本的模板浓度。该方法的基础是假设样本的效率值与标准品的效率值相同。

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