识别少突胶质细胞标志物O4。也可与精子中的某些半乳糖脂反应（列表请参见其他信息库）。

免疫组化：在未固定速冻切片上10-20μg/ml。

免疫细胞化学：在用4%多聚甲醛固定的细胞上10-20 μg/mL。

注意：O4是一种硫化物，可被有机溶剂溶出薄膜；丙酮和甲醇不能用于固定。

最佳工作稀释度必须由最终用户进行确定。

免疫组织化学方案

1.用未固定速冻组织制备切片。切片厚度应为4-5 μm。将切片放在显微镜载玻片上。

2.室温下在PBST中洗涤载玻片3次，每次5分钟。

3.阻断非特异性结合位点，将切片置于含5% FCS的潮湿室内室温孵育30分钟。

4.按第2步所述方法洗涤载玻片。

5.用足够量的MAB345 (10-20 μg/mL，PBS)覆盖切片，并在37°C的潮湿箱中孵育1小时。

6.用PBS快速洗涤载玻片3次。仔细干燥要染色的区域。

7.用足够量的抗小鼠IgM-荧光素*溶液覆盖切片，并在37°C的潮湿箱中孵育1小时。

8.按第6步所述方法洗涤载玻片。

9.用合适的包埋介质覆盖切片，盖上盖片，用荧光显微镜检查。



*也可以使用HRP或ABC。



通过滴定一级和二级抗体可获得最佳结果。



免疫细胞化学



1.用4%多聚甲醛(PBS中)在室温下固定制剂10分钟。O4是一种硫化物，可被有机溶剂溶出薄膜；丙酮和甲醇不能用于固定。

2.室温下在PBST中洗涤载玻片3次，每次5分钟。

3.阻断非特异性结合位点，将切片置于含5% FCS的潮湿室内室温孵育30分钟。

4.按第2步所述方法洗涤载玻片。

5.用足够量的MAB345 (10-20 μg/mL，PBS)覆盖切片，并在37°C的潮湿箱中孵育1小时。

6.用PBS快速洗涤载玻片3次。仔细干燥要染色的区域。

7.用足够量的抗小鼠IgM-荧光素*溶液覆盖切片，并在37°C的潮湿箱中孵育1小时。

8.按第6步所述方法洗涤载玻片。

9.用合适的包埋介质覆盖切片，盖上盖玻片，用荧光显微镜检查。



注意：在染色过程中，请勿使制剂干燥。

抗O4抗体，克隆81是一种抗O4的抗体，可用于IC、IH，已有超过50次产品引用。

形式：纯化

纯化的免疫球蛋白置于0.05M磷酸钾缓冲液中，pH 8.0，加入0.3M NaCl和0.05%叠氮化钠。

对照
大鼠皮质干细胞或小鼠胚胎脑3天细胞培养

浓度：可变，参见特定批次CoA

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