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General description
如需更多详细信息，请访问TargeTron™主页：www.sigma-aldrich.com/targetron。
TargeTron基因敲除系统可通过插入II型内含子为细菌基因的快速特异性破坏提供优化的试剂和实验流程。该方法利用II型内含子的逆转录能力以及一个简单的PCR步骤来重新靶向TargeTron II型内含子，以实现特异性的插入宿主基因组。该技术的实用性已被证明可用于原核基因工程、系统生物学和功能基因组学方法。
与现有的敲除方法相比，TargeTron系统非常快速、简单且强大。该过程包括将目标基因序列加载到Sigma网站（www.sigma-aldrich.com/targetronaccess）上经过充分验证的TargeTron算法、使用一个或多个输出的引物组通过PCR来突变TargeTron内含子模板、将片段连接至pACD4K-C线性载体中、转化宿主、诱导基因破坏、通过卡那霉素抗性选择（插入活化标记物）以及筛选所需的敲除结果。
TargeTron基因敲除系统已在广泛的细菌菌株中得到验证，如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、产气荚膜梭菌、福氏志贺菌、鼠伤寒沙门氏菌和乳酸乳球菌。该系统可经修饰而用于其他物种。
每款TargeTron试剂盒都为指定数量的设计（3 EA或10 EA）提供了访问卡和密码。该密码可使用户能够访问经过广泛验证的TargeTron算法以预测最佳的内含子插入位点，并设计用于突变内含子以插入这些位点的引物。在选择一个或多个所需插入点后，可订购所需的寡核苷酸并使用该试剂盒开始实验过程。3 EA试剂盒中的试剂足以进行3次设计及12次反应。10 EA试剂盒中的试剂足以进行10次设计及40次反应。
TargeTron基因敲除系统可通过插入II型内含子为细菌基因的快速特异性破坏提供优化的试剂和实验流程。该方法利用II型内含子的逆转录能力以及一个简单的PCR步骤来重新靶向TargeTron II型内含子，以实现特异性的插入宿主基因组。该技术的实用性已被证明可用于原核基因工程、系统生物学和功能基因组学方法。
与现有的敲除方法相比，TargeTron系统非常快速、简单且强大。该过程包括将目标基因序列加载到Sigma网站（www.sigma-aldrich.com/targetronaccess）上经过充分验证的TargeTron算法、使用一个或多个输出的引物组通过PCR来突变TargeTron内含子模板、将片段连接至pACD4K-C线性载体中、转化宿主、诱导基因破坏、通过卡那霉素抗性选择（插入活化标记物）以及筛选所需的敲除结果。
TargeTron基因敲除系统已在广泛的细菌菌株中得到验证，如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、产气荚膜梭菌、福氏志贺菌、鼠伤寒沙门氏菌和乳酸乳球菌。该系统可经修饰而用于其他物种。
每款TargeTron试剂盒都为指定数量的设计（3 EA或10 EA）提供了访问卡和密码。该密码可使用户能够访问经过广泛验证的TargeTron算法以预测最佳的内含子插入位点，并设计用于突变内含子以插入这些位点的引物。在选择一个或多个所需插入点后，可订购所需的寡核苷酸并使用该试剂盒开始实验过程。3 EA试剂盒中的试剂足以进行3次设计及12次反应。10 EA试剂盒中的试剂足以进行10次设计及40次反应。
Application
TargeTron™基因敲除系统已用于在人单核细胞衍生的巨噬细胞中进行基因的定点突变。它也被用于在金黄色葡萄球菌中破坏核酸酶基因nuc。
Features and Benefits
靶标及永久性基因破坏
简易、简化的实验流程；最多3天内完成敲除
最小的筛选以分离突变体
>90%成功靶向插入
无细胞偶联或特异性宿主因子需要
简易、简化的实验流程；最多3天内完成敲除
最小的筛选以分离突变体
>90%成功靶向插入
无细胞偶联或特异性宿主因子需要
Other Notes
如需观看TargeTron基因敲除系统动画，请访问sigma.com/targetronanimation。
系统用户手册
TargeTron访问卡（在线目标位点选择密码）
内含子PCR模板
EBS通用引物
LacZ对照引物
pACD4K-C线性载体(20 ng/μl)
JumpStart™ REDTaq® ReadyMix®
HindIII 20 U/μl
BsrGI 10 U/μl
10x 限制性酶缓冲液
TargeTron访问卡（在线目标位点选择密码）
内含子PCR模板
EBS通用引物
LacZ对照引物
pACD4K-C线性载体(20 ng/μl)
JumpStart™ REDTaq® ReadyMix®
HindIII 20 U/μl
BsrGI 10 U/μl
10x 限制性酶缓冲液
Legal Information
JumpStart is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC
REDTaq is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
TargeTron is a trademark of InGex, LLC
存储类别
10 - Combustible liquids
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Not applicable
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Not applicable
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法规信息
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